ELISA法检测人血清中SARS冠状病毒IgG抗体的建立及其应用

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严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)又称传染性非典型肺炎,是一种严重危及人类生命健康的新发传染病,从2002年11月在中国广东省首先出现并爆发流行,至2003年7月已经播散到全世界32个国家和地区,造成8千多人感染,800多人死亡的严重后果.世界卫生组织(WHO)已确认是一种新型冠状病毒为其致病原,命名为SARS冠状病毒(SARS-CoV),该病毒属于单股正链RNA病毒.由于SARS无特异性的临床表现,临床上SARS与其它发热性疾病的鉴别诊断存在困难,因此,建立简便、安全、特异、敏感的SARS冠状病毒IgG抗体检测方法对SARS的临床诊断和预防具有重要意义.为了检验本研究所建立的间接ELISA方法的准确性和特异性,用本方法对北京市宣武医院120例临床诊断为SARS的病人血清和244例不同年龄组正常人血清的SARS冠状病毒IgG抗体进行检测,结果显示在120例SARS病人的首份血清中,抗SARS冠状病毒N蛋白IgG抗体总阳性率为60%,如按病程计算,则发病第0-7、8-10、11-14、15-27和28天后不同临床患者血清中抗SARS冠状病毒N蛋白IgG抗体检测阳性率分别为0.0%、11.1%、60.0%、60.5%和70.3%,阳性率随发病时间的延长而增加.用本方法对244个正常人血清的检测结果均为阴性,其中包括100份14岁以下儿童中的血清标本.结果说明,本研究建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,可以辅助临床对SARS的诊断并用于血清流行病学调查.综上所述,本研究结果表明,利用大肠杆菌表达系统可以高效表达SARS冠状病毒的N蛋白,不仅具有外源蛋白表达产量高,易于纯化,成本低等优点,而且重组蛋白具有良好的抗原性,完全能够替代全病毒灭活抗原.所建立间接ELISA方法简单,价格低廉,能保证生物安全,对SARS可疑病例的确诊和排除具有重要的实际应用价值,并可用于SARS高危人群的血清流行病学监测,SARS疫情的控制和预防,以及SARS冠状病毒蛋白功能的研究.
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