【摘 要】
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该论文以非淡相合成单甘酯用脂肪酶产生菌株假单胞菌JW12为出发菌株,进行了诱变育种、发酵工艺、酶制剂初步提取条件的研究、并用制备的粗酶在非水相酶法合成单甘酯合成上进
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该论文以非淡相合成单甘酯用脂肪酶产生菌株假单胞菌JW12为出发菌株,进行了诱变育种、发酵工艺、酶制剂初步提取条件的研究、并用制备的粗酶在非水相酶法合成单甘酯合成上进行初步应用.出发菌株假单胞菌JW12经过亚硝基胍诱变和多次分离纯化,得到一株高产脂肪酶菌株JWPP7,遥瓶发酵酶活比出发菌株酶活力提高1.2倍.在遥瓶中对产酶的最佳培养基组成进行了优化,确定了用于工业化生产的培养基组成:菜油2%,豆饼粉3.48%,玉米浆0.71%,NaNO<,3>0.65%,K<,2>HPO<,4>0.5%,MgSO<,4>7H<,2>O0.1%,在初步探讨了该菌株产酶影响因素后,在遥瓶中采用分批补加菜油发酵酶活达到106.24u/ml,补加吐温80脂肪酶酶活达117u/ml.在25L罐中研究了通过连续流加菜油或流加吐温80对发酵产酶的影响,在罐中实验最佳条件下,脂肪酶最高活力达到330u/ml.通过预处理、提取、干燥对脂肪酶发酵液进行了提取条件的初步研究,25L罐中脂肪酶发酵液经过盐析、干燥提取脂肪酶总回收率为74.1%,超滤、冷冻干燥回收酶总回收率90.5%.用制备的脂肪酶进行酶法合成单甘酯的应用实验,单甘酯最高转化率62.4%,取得了比较好的催化效果.
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