脑心通胶囊对VD模型大鼠海马神经元静息态[Ca]及pCREB蛋白表达的影响

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本研究的目的是观察脑心通胶囊对VD模型大鼠行为学、海马组织形态学、海马神经元静息态[Ca<2+>]及pCREB蛋白表达的影响,初步探讨脑心通胶囊对VD模型大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。 方法:将50只SD大鼠完全随机分为正常组、假手术组、模型组、脑心通胶囊组和喜得镇组。采用MCAO制作VD大鼠模型,跳台试验测定大鼠学习记忆成绩,取脑组织作冰冻切片,HE染色,观察大鼠海马组织形态学改变。使用胰蛋白酶消化法制备海马组织单细胞悬液,Fura-2/AM负载分离的神经细胞,双波长荧光法测定海马神经细胞内静息态[Ca<2+>]<,i>。免疫组化法观察pCREB在大鼠海马组织神经元中的表达。 结果:(1)跳台实验中,与假手术组和正常组比较,模型组大鼠表现为反应时间延长(P0.05)。(2)光镜观察显示,假手术组和正常组大鼠海马CAl区锥体细胞排列紧密整齐,无明显神经元脱失;模型组大鼠海马CAl区锥体细胞排列稀疏、紊乱,神经元脱失明显,可见胶质细胞增生,中、西药治疗组大鼠海马CAl区神经元脱失现象明显减轻,锥体细胞形态较正常,排列较整齐,接近假手术组。(3)模型组大鼠海马神经细胞静息态[Ca<2+>]<,i>为437.42±32.14nmol/L,显著高于假手术组189.83±18.57nmol/L和正常组181.05±16.57 nmol/L(P<0.05);中药组和西药组大鼠海马神经细胞静息态[Ca<,2+>]<,i>分别为252.61±20.15 nmoI/L、237.34 4±19.83nmol/L,较模型组显著降低(P0.05)。(4)免疫组化结果显示,模型组大鼠海马CA<,l>区免疫组化积分为0.85±0.59,显著低于假手术组和正常组大鼠海马免疫组化积分5.00±0.73、5.56±0.61(P<0.05);中药组和西药组大鼠海马免疫组化积分为4.30±0.80、4.45±0.69,较模型组显著增加(P<0.05),两治疗组相比无显著性差异(P>0.05)。 结论:(1)脑心通胶囊能够提高VD大鼠的学习记忆能力,减轻VD大鼠海马CAl区神经元脱失现象,改善VD大鼠海马锥体细胞形态,对VD大鼠有治疗作用。(2)脑心通胶囊可降低VD大鼠海马神经细胞静息态[Ca<2+>]<,i>,促进VD大鼠海马CA<,l>区pCREB的表达,这些可能是脑心通胶囊治疗血管性痴呆的部分作用机制。
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