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1.目的: 1.1细胞凋亡在肿瘤发生中的作用逐渐被人们认识，已有的证据表明细胞凋亡与肿瘤的发生发展密切相关，对肿瘤的发生、发展和治疗具有重要的影响。肿瘤的发生，是由于细胞增殖与细胞凋亡平衡失调的结果，细胞凋亡在肿瘤生长过程中起负调控作用，可以阻碍肿瘤迅速增长。经肝动脉化疗栓塞(TACE)是目前中晚期肝癌最主要的微创疗法，以往研究认为其主要作用机制是局部化疗和血管栓塞引起肿瘤组织细胞坏死，近年有学者认为化疗栓塞诱导肿瘤细胞凋亡可能是TACE治疗肝癌的重要机制之一，但是经肝动脉化疗栓塞对引起肝癌细胞凋亡的作用有多少，能使凋亡持续多久，凋亡何时又是高峰，也即是凋亡的动态变化，目前国内外尚无文献报道。
1.2兔VX2肝癌模型是介入治疗肝癌的基础及临床研究的理想动物模型，本研究的目的和意义即在于通过建立新西兰大白兔移植性VX2肝癌模型，模拟人经股动脉肝动脉插管行化疗栓塞治疗，研究经肝动脉化疗栓塞引起癌细胞凋亡在肿瘤组织死亡中的贡献；探索经肝动脉化疗栓塞后早期肿瘤细胞凋亡的动态变化过程，探讨介入治疗肝癌的机理。在兔VX2肝癌模型动物实验中，模拟人经股动脉肝动脉插管介入治疗的方法目前较少，尚未形成一个对实验兔影响小的、成熟的经验，因此本实验也通过对兔VX2肿瘤模拟人经股动脉肝动脉插管介入实践，探索实验性肝动脉化疗栓塞技术，为之提供经验借鉴。
2.方法: 2.1建立27只新西兰大白兔VX2肝癌模型，随机分成肝动脉化疗栓塞组(Transarterialchemoembolization，TACE)、灌注化疗组(Transarterialinfusion，TAI)、灌注肝素生理盐水组(对照组，Control)，每组各9只，采用模拟人经股动脉肝动脉插管介入治疗方法给以不同处理。TACE组灌注[超液化碘油0.3ml+表阿霉素0.5mg+造影剂0.2ml]抗癌化疗药物乳剂，TAI组灌注表阿霉素0.5mg，Control灌注肝素生理盐水。分析VX2肿瘤接种成功率，经DSA造影观察兔肝固有动脉，肝左、右动脉内径，分别超选择插管至兔肝固有动脉和肝左、右动脉成功率，肿瘤血供情况。
2.2介入治疗后每组再随机分成3个亚组，每亚组3只。在处理后的第24、72、120小时分别处死3组中的一亚组。
2.3取材肿瘤生长活跃的非坏死区的外带组织用流式细胞仪AnnexinV和PI双标记法定量检测细胞凋亡，组织病理切片苏木精-伊红染色(HE染色)和甲基绿-派洛宁染色(MG-P染色)光镜下形态学方法观察不同时间肿瘤细胞的凋亡变化。
3.结果: 3.1兔VX2肿瘤接种成功率高，为100％。兔肝固有动脉内径多小于1mm，肝左、右动脉内径0.6-0.7mm，兔肝左动脉较肝右动脉略粗大。肝固有动脉插管均成功，为100％，仅有2只肝左动脉插管成功，7.4％，无1只兔可超选择至肝右动脉插管。3.2TACE、TAI、Control组在治疗后24、72、120小时流式细胞仪法定量检测肿瘤边缘区细胞凋亡比率分别为11.44±2.15、10.99±1.74、6.00±0.58，5.84±0.68、4.65±0.11、2.88±1.23和2.80±0.15、2.19±1.69、2.51±2.13；HE染色法观察凋亡指数分别为5.05±1.02、4.52±0.51、2.81±0.29，1.29±0.13、0.62±0.61、0.77±0.61，0.84±0.11、0.89±0.19、0.72±0.17；MG-P染色法观察凋亡指数分别为5.24±1.36、4.60±0.64、2.73±0.13，1.43±0.49、1.05±0.23、0.96±0.11，1.00±0.40、0.96±0.40、0.99±0.63。据FCM法，TACE、TAI、Control组凋亡在各时间点均有显著差异(P＜0.01)，TACE组24、72小时的凋亡明显高于120小时(P＜0.05)。TACE组诱导的肿瘤细胞凋亡比率明显高于TAI、Control组；TACE组诱导的肿瘤细胞早期凋亡比率随时间呈下降趋势，在120小时凋亡仍明显高于其它2组。HE染色法与MG-P染色法其凋亡指数观察结果的变化趋势是与FCM一致。
4.结论: 4.1本研究显示兔VX2肿瘤肝内接种成功率高，为富血供性肿瘤，其血供主要来自于肝动脉，是介入治疗肝癌的基础及临床研究的理想动物模型。
4.2本研究显示经动脉化疗栓塞所诱导的肿瘤细胞凋亡显著高于化疗灌注，凋亡高峰期持续较长，是化疗栓塞后肿瘤细胞大量死亡的主要转归途径之一。
4.3化疗栓塞后早期肿瘤细胞凋亡水平高，随时间推移下降，这可能与其所致的持续高死亡率和随时间推移局部高化疗药物浓度下降，缺血缺氧缓解、细胞毒物质清除等等复杂的肿瘤细胞凋亡诱导因素减弱相关。
4.4经肝动脉化疗栓塞早期即诱导大量癌细胞进入凋亡，是TACE治疗肝癌的重要要机制。研究经动脉化疗栓塞对促进肝癌细胞凋亡的作用，诱导肝癌细胞大量凋亡，对于进一步提高肝癌介入治疗的疗效具有积极的意义。
4.5本研究显示肝动脉插管路径长而纤细，肝左、右动脉超选择性插管在现有器材条件下极为困难，肝固有动脉插管有大的成功率；我们对兔腹腔动脉血管解剖的分析，以及模拟人经股动脉肝动脉插管介入治疗，为肝动脉插管进行VX2肿瘤介入研究实践提供了经验，证明该方法是成熟可行的；兔肝动脉血管床容量小，注射药物承受小。