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灰树花是一种极具开发价值的珍贵食药用真菌。其主要功能性成分为多糖，具有抗肿瘤、免疫调节和抑菌等作用。目前从灰树花子实体中分离纯化得到的多糖已经初步被证实能够抑制肿瘤细胞的生长增殖。然而，关于灰树花多糖抗肿瘤作用机理方面的研究报道却很少。 本实验通过超滤、葡聚糖凝胶过滤层析等方法对灰树花子实体多糖进行分离纯化，得到多糖组分GFD。琼脂糖凝胶电泳及高效液相色谱分析结果表明，GFD分子量约为30kDa。理化性质分析实验结果表明，GFD为不含还原性羰基、酚羟基、游离或结合的蛋白质、核酸类物质的非淀粉类α-吡喃多糖，其糖链高度在1nm左右。通过细胞体外增殖抑制实验(MTT)表明GFD可以抑制人类肝癌细胞HepG2的生长，且呈明显的浓度依赖关系;通过HE染色、Hoechst33342染色，AO/EB双染和扫描电镜观察发现，经GFD作用的HepG2细胞呈典型的凋亡形态学特征;经流式细胞仪分析，HepG2细胞被阻遏在S期，凋亡率随作用时间的延长而增加。 通过荧光染色、免疫印记及流式细胞术检测可知:GFD抑制HepG2细胞内Notch1的表达，并且使Akt的磷酸化表达下降;同时使MAPK家族JNK的磷酸化表达上调;GFD分别与Notch1抑制剂(DAPT)，JNK抑制剂(SP600125)和Akt抑制剂(LY294002)共同作用于HepG2细胞，其凋亡率结果证明Notch1，JNK和Akt均参与了GFD诱导的细胞凋亡。另外，JNK磷酸化的上升抑制了NF-κB/p65入核，同时，NF-κB下游靶基因FLIP和Bcl-2的表达被下调，进而引发Caspases级联反应，最终引发HepG2细胞凋亡。