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目的:①通过分析临床病例来探讨嗜酸性粒细胞(EO)和总IgE在特应性皮炎(AD)患儿中的水平差异,研究两者与疾病严重程度之间的关系,并分析其对疾病的诊断价值。②完善自皮片分离细胞技术,获得质量较高的LCs,明确表皮内LCs上Langerin与多种变应原多糖抗原的结合能力,以及其参与LCs对多糖抗原摄取和递呈的过程和诱导T细胞分化过程中所起的作用。 方法:①收集2016年1月至2016年8月期间中国医学科学院皮肤病医院门诊收治的154例AD患儿为研究对象,并选取同期的317例体检的健康幼儿和儿童为对照,设为AD组和对照组。采用SYSMEX SE-9500全自动血细胞分析仪和ImmunoCAP过敏原检测系统分别测定两组血液中EO、总IgE水平,应用SPSS20.0软件分析两组EO、总IgE水平差异的统计学意义;分析AD组EO、IgE与SCORAD评分的相关性;绘制AD组和对照组EO、总IgE的ROC曲线,计算曲线下面积。②在局部微环境下(TSLP)进行LCs成熟前后对数种多糖抗原的免疫识别的研究;比较皮肤爬片技术和单悬液技术的细胞生存率和Langerin表达水平的差异;进行在上述活化状态下的LCs对初始T细胞极化的研究。以上指标均以P<0.05为差异有统计学意义。 结果:①AD组和对照组的EO总数分别为(0.40±0.03)×109、(0.13±0.01)×109;两组血清中总IgE水平分别为(684.4±95.22)、(44.24±1.37)IU/ml,AD组EO、总IgE水平较对照组明显升高(P<0.001);EO、总IgE与SCORAD均呈正向相关(P<0.001,P<0.01);两组EO、总IgE水平的ROC曲线下面积为0.76,0.79(P<0.001)。②表皮活细胞群中CD207与CD1a双阳性率为(4.6±0.7)%,符合LCs在表皮中的比例3~5%;与Blank相比,加入derp,TSLP+derp,OVA,α-gal刺激物后均出现CD80,CD83,CD86,HLA-DR的表达水平呈不同程度的上升现象(P<0.05);同时证明爬片技术比单悬液技术细胞成活率高,分别为(94.6±14.2)%和(76.3±13.1)%(P<0.01),并且CD207阳性率也明显增多,分别为(16.8±4.7)%和(12.1±3.5)%(P<0.01);derp组和Blank组的细胞上清液中IL-4浓度为(368.4±73.1)pg/ml和(195.3±53.7)pg/ml,IFN-γ浓度分别为(278.6±79.2)pg/ml和(631.0±103.5)pg/ml;与Blank组相比,derp组上清中IL-4浓度显著升高(P<0.01),而IFN-γ浓度则是降低趋势(P<0.005)。 结论:①AD病人EO、总IgE水平高于正常人,对AD病情严重程度尤其中重度具有一定的提示作用,EO、总IgE可以做为一个AD临床病情评估指标。②皮肤爬片技术优于单悬液技术。LCs细胞上的Langerin可参与变应原多糖抗原的识别、摄取和递呈,LCs在诱导T细胞分化过程中起到关键作用。