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目的:制备一种携血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factorreceptor-2,VEGFR-2)抗体的靶向纳米级超声造影剂,评价其对兔腹主动脉粥样硬化易损斑块的增强显影效果。 方法:采用高频机械震荡法,制备包封SF6气体的普通纳米超声造影剂和生物素化的纳米级超声造影剂,采用生物素-亲和素的连接方式将生物素化造影剂与生物素化VEGFR-2进行结合,异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC) FITC IgG标记VEGFR-2抗体。检测两种造影剂的粒径、浓度,观察其形态,测定靶向微泡抗体携带率等。采用球囊拉伤腹主动脉+高脂喂养的方法,建立兔腹主动脉粥样硬化易损斑块模型。分别将两种造影剂从兔耳缘静脉注入,造影条件下均连续采集图像3min,用QLAB系统软件对感兴趣区(region of interest,ROI)进行时间-强度曲线分析。造影结束后处死动物,取腹主动脉进行免疫组织化学VEGFR-2的染色,观察其表达部位及程度,斑块显影强度及免疫组织化学结果分别进行统计分析。 结果:(1)两种造影剂均可使血管显影增强,而靶向造影剂对易损斑块的检出率更高,持续显影时间更长。 (2)免疫组织化学VEGFR-2染色在血管内膜及斑块内部均可见多处阳性染色,动脉斑块内可见丰富的新生血管。斑块显影强度及免疫组织化学结果分别进行统计分析。 结论:本实验成功制备了携VEGFR-2的靶向纳米超声造影剂,成功制备动脉粥样硬化兔易损斑块模型,该造影剂对易损斑块有明显的增强显影的效果,为以后的临床检测方法提供了新的思路。