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博尔纳病病毒 (Borna Disease Virus,BDV)是1997年新分类的非分节段的单负股RNA病毒,BDV具有嗜神经性,可以感染全世界范围动物的中枢神经系统而引起持续性的、非溶细胞病变性的感染。BDV感染后动物可以出现诸如急性致死性脑炎、慢性、轻微的神经与精神行为的改变等多种形式的临床表现。近年来,国内外的一些研究者报道人类的神经精神疾病,如精神分裂症、慢性疲劳综合症、迟发型运动障碍等的发生可能与BDV的感染有关。BDV能够产生可溶性抗原,其中包括BDV核蛋白N(40 kD)和磷蛋白P(24 kD)。BDV P24及BDVP40是BDV的两种重要的蛋白,可能在机体的免疫保护和发病机制中起着重要的作用。
淋巴细胞杂交瘤技术在蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。1975年,Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术,形成的杂交瘤细胞既可产生特异性抗体,又可无限增殖。杂交瘤细胞系所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的抗体,即所谓单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。
为了评价博尔纳病病毒抗原免疫的杂交瘤细胞系的产生抗体能力与抗体特异性,本实验随机抽取两株由。BDV P24及BDV P40抗原免疫的杂交瘤细胞系H<,1>和H<,2>,通过体内和体外方法制备McAbs,同时建立用于检测该McAbs的ELISA实验方法,对McAbs的效价进行定量测定,并通过间接免疫荧光、免疫印迹、免疫组化等实验方法对所制备的抗体进行特异性鉴定及效价测定。结果发现杂交瘤细胞系H<,1>和H<,2>可以产生一定效价的单克隆抗体,并对BDV的P24和P40抗原具有特异性,可以用于检测BDV特异性抗原。