论文部分内容阅读
第一部分、二甲双胍对慢性应激诱导的大鼠抑郁样行为的作用 目的：重度抑郁症（major depression，MDD）是危害人类健康的精神疾病，同时也是造成青壮年人群死亡的主要原因之一，因此其对于劳动力的负面影响尤为巨大。近年来，临床调查研究发现，另外一种威胁人类健康的疾病—2型糖尿病（type2 diabetes mellitus，T2DM），和MDD往往并发，且临床实践中发现治疗T2DM的药物，在治疗过程中，不仅有对T2DM的改善作用，同时还缓解了抑郁症状，由于二甲双胍在T2DM的临床治疗上最为常用，因此尤为令人关注。本部分将论证二甲双胍的抗抑郁作用，并初步研究其抗抑郁作用特点。 方法：采用慢性不可预知性温和应激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）模型以模拟大鼠的抑郁样行为；采用糖水偏好实验（sucrose preference test，SPT）、新型环境摄食抑制实验（novelty-suppressed feeding test，NSF）、强迫游泳实验（forced swim test，FST）行为学检测，来观察外源性腹腔注射二甲双胍对CUMS大鼠的抑郁样行为的影响；采用自发活动测试、血糖测试仪分别检测二甲双胍给药前后CUMS动物的行为活动和血糖水平。 结果：CUMS大鼠造模后，相对于对照组，SPT中动物对糖水的偏好率下降，NSF中动物对食物摄取的潜伏时间增加，FST中不动时间增加。腹腔注射二甲双胍给药后，SPT糖水偏好率、NSF摄食潜伏时间和FST不动时间恢复，显示腹腔注射二甲双胍对大鼠抑郁样行为有改善作用；二甲双胍给药前后，自发活动测试动物的移动距离无显著性差别；给药前后动物血糖水平亦未见显著变化。 结论：慢性应激诱导大鼠抑郁样行为，而二甲双胍腹腔注射对大鼠抑郁样行为有改善作用，这种改善作用在腹腔给药1周后达到最佳抗抑郁效果。此条件下，二甲双胍不影响自发活动和血糖水平，无明显中枢和外周不良反应。 第二部分 二甲双胍抗慢性应激大鼠抑郁样行为的作用机制 目的：二甲双胍对 AMPK 的激活是其发挥药理学作用主要机制之一，因此，我们将研究AMPK的激活是否参与了二甲双胍的抗抑郁作用。另外，由于AMPK对mTOR信号通路有负性调节作用，而后者的激活在快速抗抑郁症中的作用备受关注。因此，mTOR也可能介导了二甲双胍的抗抑郁样作用。同时，必须关注其在发挥抗抑郁条件下是否影响脑组织糖代谢水平。本部分实验将对二甲双胍抗抑郁的机制进行研究。 方法：我们分别以磷酸化的AMPK和p70S6K来反映AMPK和mTOR的活性。应用Western blot检测二甲双胍对CUMS大鼠海马脑区AMPK的磷酸化水平和p70S6K的磷酸化水平的影响；通过 18F-FDG正电子发射断层显像（poistron emission tomography，PET）技术，检测二甲双胍给药前后CUMS大鼠海马脑区的糖代谢水平。 结果： PET 检测动物脑内糖代谢水平发现，与对照组相比，CUMS 抑郁症大鼠海马脑区糖代谢水平显著下降，而二甲双胍不影响 CUMS 大鼠海马脑区糖代谢水平；Western blot检测结果证明，腹侧海马（ventral hippocampus，vH）在使用二甲双胍前后，AMPK 磷酸化没有被激活。背侧海马（dorsal hippocampus，dH）同样如此；而CUMS能造成p-p70S6K下调，在使用二甲双胍后，海马p-p70S6 K下调被逆转。说明二甲双胍不影响海马vH和dH脑区AMPK的磷酸化水平，但能逆转p-p70S6K下调。 结论：二甲双胍发挥抗抑郁作用机制，与 AMPK 的激活没有直接关系；而与 mTOR的激活有关。说明二甲双胍引起的mT O R活性增加可能是二甲双胍抗抑郁的靶点，为二甲双胍的老药新用指出了一个新的方向。