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目的通过制备脂多糖(LPS)致大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)损伤模型,研究二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)对炎症状态下GMCs表达基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨EPA、DHA对损伤的GMCs可能的保护机制。方法与结果1.实时定量PCR方法检测EPA、DHA对LPS刺激GMCs MMP-2/TIMP-2 mRNA的表达体外培养大鼠GMCs,取第4代细胞计数后按1×105细胞／孔浓度接种于6孔培养板,实验分六组：正常对照组；LPS刺激组(LPS终浓度为10μg·mL-1)EPA(终浓度10μmol·L-1、100μmol·L-1)组；DHA(终浓度10μmol·L-1、100μmol·L-1)组。培养48h后,实时定量PCR方法检测MMP-2、TIMP-2mRNA表达。结果显示：LPS刺激能够使GMCs表达MMP-2 mRNA及MMP-2/TIMP-2比值明显降低、TIMP-2 mRNA明显增高(P<0.01)。EPA、DHA显示出了对MMP-2、TIMP-2 mRNA表达的抑制作用及对MMP-2/TIMP-2比值的促进作用。2.实时定量PCR方法检测EPA、DHA对LPS刺激GMCs MMP-9/TIMP-1 mRNA的表达取第4代细胞计数后按1×105细胞／孔浓度接种于6孔培养板,实验分组同上。培养48h后,实时定量PCR方法检测MMP-9、TIMP-1mRNA表达。结果显示：LPS刺激能够使GMCs表达MMP-9 mRNA及MMP-9/TIMP-1比值明显降低、TIMP-1 mRNA明显增高(P<0.01)。EPA、DHA显示出了对MMP-9、TIMP-1mRNA表达的抑制作用及对MMP-9/TIMP-1比值的促进作用。3.实时定量PCR方法检测EPA、DHA对LPS刺激GMCs PPARy mRNA的表达细胞计数后按1×105细胞／孔浓度接种于6孔培养板,实验分组同上。分别培养24h、48h、72h后,实时定量PCR方法检测PPARy mRNA表达。结果显示：LPS刺激GMCs后,细胞表达PPARy mRNA明显减少(P<0.01)。EPA、DHA能促进GMCs PPARy mRNA的表达。4.实时定量PCR方法检测EPA、DHA对LPS刺激GMCs MCP-1、TGF-β1 mRNA的表达细胞计数后按1×105细胞／孔浓度接种于6孔培养板,实验分组同上。分别培养24h、48h、72h后,实时定量PCR方法检测MCP-1、TGF-β1 mRNA表达。结果显示：LPS刺激GMCs后,细胞表达MCP-1、TGF-β1 mRNA明显增加(P<0.01)。EPA、DHA能抑制GMCs MCP-1、TGF-β1 mRNA的表达。5.免疫细胞化学方法检测EPA、DHA对LPS刺激GMCs PPARγ、TGF-β1蛋白的表达细胞计数后按1×104细胞／孔浓度接种于24孔培养板,实验分组同上。培养48h后,免疫细胞化学方法检测PPARγ、TGF-β1蛋白。结果显示：LPS刺激GMCs后,细胞分泌PPARy蛋白明显减少、TGF-β1蛋白明显增加(P<0.05)。正常组细胞的胞浆区染色低,LPS组的细胞则可见明显的黄染。EPA、DHA显示出了对PPARγ蛋白分泌的促进作用及对TGF-β1蛋白分泌的抑制作用。结论1 EPA、DHA能抑制LPS刺激的GMCs表达MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2mRNA,提高MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值。2 EPA、DHA能促进LPS刺激的GMCs PPARy mRNA及蛋白的表达。3 EPA、DHA能抑制LPS刺激的GMCs MCP-1 mRNA的表达。4 EPA、DHA能抑制LPS刺激的GMCs TGF-β1 mRNA及蛋白的表达。