桃儿七种子离体培养与植株2种有效成分含量研究

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本论文选用我国重要濒危药用植物桃儿七[Sinopodophyllum hexandrum(Royle) Ying]为研究对象,以保护濒危物种为目的,通过研究在离体培养条件下浸种时间、接种方式、培养基类型等处理对桃儿七种子萌发的影响,确立了桃儿七种子离体培养的最佳接种方式及优化条件,同时,在此基础上探讨了种皮对桃儿七整粒种子萌发的影响,并采用正交设计试验优化了桃儿七种子整粒萌发的离体培养条件。最后通过采用HPLC测定2种药用成分鬼臼毒素和4-去甲基鬼臼毒素在不同类型桃儿七植株中不同部位的含量,分析了2种药用成分在桃儿七药材不同部位的含量分布与动态变化,确定了五年生栽培植株的最佳用药部位及最佳采收期。主要研究结果如下:  1.通过比较浸泡时间、接种方式、不同培养基类型对桃儿七种子萌发的影响,结果表明:将桃儿七种子浸泡48h后,以种胚形式接种至1/4MS培养基中,获得的桃儿七种子萌发率最高,达97.73%;同时,0.3%的Na2CO3、3.0%NaHCO3和2.0%NaClO均可有效促进桃儿七种子种胚的萌发。  2.浓硫酸处理和机械去皮均能有效促进桃儿七种子整粒的萌发,同时能促进赤霉素(GA3)对桃儿七种子萌发的促进作用;通过采用三因素四水平正交设计优化去皮桃儿七种子整粒萌发离体培养的条件,结果表明:温度、GA3和培养基类型对去皮桃儿七种子整粒萌发的影响顺序为:温度>培养基类型>GA3,此实验中,最适离体培养条件为:温度25℃,GA3浓度100ppm,培养基类型WPM。  3.鬼臼毒素在不同类型植株(组培苗、栽培植株和野生植株)不同部位分布状况均表现为:根>茎>叶,4-去甲基鬼臼毒素在不同类型植株不同部位分布状况则有所不同;栽培桃儿七植株(五年生)的最佳采收期为7月中下旬,其中7月份根中鬼臼毒素含量达7.958mg·g-1。
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