转抗虫基因杨树对土壤微生物影响及分子检测

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转基因生物的安全性问题已引起国际社会的广泛关注。林木植物杨树由于个体高大、生长周期长等特点,因此转基因杨树对周边生态环境影响持久。本研究选择转抗虫基因(Bt毒蛋白基因)南林895杨为试验材料,开展了转基因杨树根系分泌物对土壤微生物影响、分子检测等分析,对转基因杨树生物安全及目的基因遗传稳定性进行初步评估检测,为转基因杨树的田间试验及环境释放提供依据。主要研究结果如下:(1)通过对春、夏、秋、冬四季采集的转抗虫基因(Bt毒蛋白基因)895杨根系土壤微生物可培养类群与对照进行了比较分析,初步结果表明四季内转抗虫基因895杨根际土壤微生物中细菌、真菌与对照比没有显著差异,表明转抗虫基因895杨对其根系的土壤微生物群落的影响不显著。(2)对移栽苗圃1年生转抗虫基因895杨PCR检测结果显示,4个转抗虫基因株系(分别为B1、B5、B16、B21)扩增获得了外源目的基因片段。(3)1年生转抗虫基因895杨的PCR-southern印迹杂交检测结果证明转基因895杨中Bt抗虫外源基因为单拷贝存在于杨树基因组中。(4)对实验室组培苗转抗虫基因895杨B21号株系的RT-PCR检测分析结果表明转入的抗虫外源目的基因已得到稳定表达。
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