【摘 要】
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目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts，CFs)的作用及其机制。 方法：差速贴壁法体外培养心肌成纤维
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目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts，CFs)的作用及其机制。 方法：差速贴壁法体外培养心肌成纤维细胞，采用免疫细胞化学方法以波形蛋白鉴定心肌成纤维细胞纯度；MTT法检测AngⅡ促进心肌成纤维细胞增殖率；采用重组腺病毒用转染方法在心肌成纤维细胞中过表达SHP-2，用SHP-2抑制剂NSC-87877作用AngⅡ刺激下的心肌成纤维细胞，然后MTT测定细胞增殖率，Western blot检测Ⅰ型胶原蛋白和明胶酶谱法检测MMP-2的活性，Western blot检测ERK及p-ERK蛋白的表达。 结果：心肌成纤维细胞的增殖作用对AngⅡ有剂量依赖性，其促进细胞增殖的最高浓度为10-7mol/L；在AngⅡ的刺激下，SHP-2可以促进心肌成纤维细胞增殖，并且功能增强型突变体组比野生型组增殖更明显(P<0.01)；SHP-2抑制剂NSC-87877达到50μmol/L时可以明显抑制AngⅡ刺激下的心肌成纤维细胞增殖。AngⅡ单独作用下，心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的分泌增加，MMP-2活化减少，ERK的磷酸化作用增强；SHP-2过度表达反而减少AngⅡ刺激下的心肌成纤维细胞对Ⅰ型胶原的分泌，增加了MMP-2的活化量，ERK的磷酸化作用减弱；50μmol/L的NSC-87877的加入增加了Ⅰ型胶原蛋白的表达量，增强了ERK的磷酸化作用，抑制了MMP-2的活化。 结论：SHP-2正相调节AngⅡ对心肌成纤维细胞增殖的作用；SHP-2调控AngⅡ诱导的心肌细胞外基质的重塑作用。
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