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目的:通过原位末端标记(tunel)法检测外阴上皮细胞凋亡指数(AI)及免疫组化法检测外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)蛋白和细胞周期蛋白Cyclin D1的表达,从细胞凋亡与细胞周期调控及两者的联系的角度探索NNEDV的发生、发展,为NNEDV的发病机制及治疗的研究奠定基础。方法:收集2013年3月-2014年10月因外阴反复瘙痒在泸州医学院附属医院就诊并行病变部位活检术,并病理诊断为NNEDV的患者的外阴病变部位组织及病变旁肉眼观正常组织,分别39例,依据病理类型分为外阴硬化性苔藓(VLS)组24例、外阴鳞状上皮增生(VSH)组10例和混合病变组5例。采用tunel法检测病变组与病变旁组外阴上皮细胞AI,免疫组化法检测在病变组与病变旁组中RASSF1A和cyclinD1在上皮的表达情况,采用Image Pro6.0专业图像分析系统分析统计阳性细胞平均光密度(mean optical density,MOD)值,统计分析RASSF1A和cyclinD1在各组外阴皮肤上皮细胞中的表达情况及相关性。统计学方法:采用SPSS17.0统计软件处理所得实验数据,P<0.05有统计学意义。结果:1、病变组、病变旁组凋亡指数检测情况:病变组AI小于病变旁组AI,差异有统计学意义(P<0.05)。2、RASSF1A在病变组及病变旁组表达情况:病变组小于病变旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。在VSH病变组中RASSF1A蛋白的表达强度明显小于病变旁组,且有统计学意义(p<0.05),在vls病变组中rassf1a蛋白的表达强度小于病变旁组,差异有统计学差异(p<0.05),rassf1a蛋白在混合型组表达表达水平小于病变旁组,但无统计学意义(p>0.05)。各nnedv病理类型(vsh、vls、混合病变型)三组之间,rassf1a的表达差异无统计学差异(p>0.05)。3、cyclind1在病变组及病变旁组表达情况:病变组大于病变旁组,差异有统计学意义(p<0.05)。在vsh组cyclind1的表达强度大于病变旁组,且有统计学意义(p<0.05),cyclind1蛋白在vls组的表达强度大于与病变旁组,但差异无统计学差异(p>0.05),cyclind1蛋白在混合型组表达表达水平大于与病变旁组,且有统计学意义(p<0.05)。各nnedv病理类型(vsh、vls、混合病变型)三组之间,cyclind1的表达差异无统计学差异(p>0.05)。4、ai与rassf1a在vsh病变组中呈明显正相关(r=0.628,p=0.001<0.05);在vls病变组中呈明显正相关(r=0.928,p=0.00<0.05);在混合病变组中呈明显正相关(r=0.935,p=0.02<0.05);两者在病变旁组中呈明显正相关(r=0.363,p=0.023<0.05)。5、ai与cyclind1在vsh病变组中呈负相关(r=-0.499,p=0.013<0.05);在vls病变组中不相关(r=-0.058,p=0.873>0.05),在混合病变组中不相关(r=-0.036,p=0.954>0.05),两者在病变组中呈负相关相关(r=-0.477,p=0.002<0.05。6、rassf1a与cyclind1在vsh组中表达呈明显负相关(r=-0.711,p<0.01<0.05),两者在vls组中表达呈不相关(r=-0.464,p=0.177>0.05),两者在混合病变组中表达呈不相关(r=-0.236,p>0.05);在病变旁组中两者表达呈不相关(r=-0.046,p>0.10>0.05)。结论:1、病变组AI明显低于病变旁组,且VSH组、LSH组及混合病变组所测AI均低于其病变旁组,推测NNEDV的发生机制与细胞凋亡异常密切相关。2、RASSF1A蛋白在VSH组及VLS组中的表达较其对应病变旁组织明显降低,且与所测AI呈明显正相关,RASSF1A蛋白表达缺失使外阴上皮细胞凋亡途径受阻,上皮细胞的异常增殖可能导致NNEDV病变的发生。3、cyclinD1蛋白在VSH组及混合病变组的表达明显高于其对应病变旁组的表达,与病变组所测AI呈负相关,cyclinD1过表达引起凋亡减弱、细胞增殖可能参与了VSH及混合型病变的致病过程。但VLS组cyclinD1蛋白的表达差异无统计学意义,可能考虑VLS为萎缩性改变性疾病,促进上皮的增殖作用在VLS的发病中可能不起主要作用。4、RASSF1A与cyclinD1在VSH病变组的的表达呈负相关,表明RASSF1A蛋白表达下调,可能使cyclin D1蛋白的积聚增加,凋亡减弱,促使VSH病理类型的形成。而在VLS及混合病变组中两者表达表达呈不相关,推测其发病机制是一个多因素、多因子作用的过程,具体机制有待进一步研究。