环孢素A与雷公藤多甙联用在大鼠心脏移植中的研究

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背景:1967年12月4日,南非开普敦的巴纳德医师,首次成功地完成了人类异体心脏移植手术,使全世界都为之惊慌与兴奋。经过多年基础研究和临床实验,当前认为同种异体心脏移植是治疗终末期心脏“泵衰竭”及不可矫治性先天性心脏病的唯一有效手段。随着现代医学技术的发展及免疫药物的研究进展,心脏移植使日益增多的终末期泵衰竭患者受益,走向高质量甚至正常的生活,心脏移植越来越得到肯定。免疫反应是人体对外来异物的反应,它对于因细菌、病毒等引起的疾病是一种非常有效的防御作用。不幸的是人体并不会加以区别,对所有经它辨识为非己之物,哪怕是为了拯救生命而移植来的心脏、肾脏等器官也会毫不留情地加以排斥,这样就使得器官移植遇到了极大的困难。要使器官移植获得较高的成功率,除了要不断提高手术技术和改进各种医疗器械,如使用体外循环的心肺机等,最重要的是要寻找免疫排斥反应的根源和解决器官移植中免疫排斥的方法。目前,供心保存、外科手术技术、术后感染已不再是阻碍心脏移植成功的最主要因素。但术后移植心脏功能的维持需要终身服用免疫抑制剂来预防或控制各种排斥反应。目前,最常用的环孢素A、硫唑嘌呤(Aza)、强的松(SABC)等,都旨在非特异性地阻断T细胞的活化,也就是移植物排斥反应的原始机制。但不幸的是,这些药存在着毒副作用大,治疗窗口窄等问题。且随着长期存活的患者不断增多,这些问题日益突出,包括肝肾毒性、血脂异常、糖尿病和增加感染及恶性肿瘤发生危险性等等。所有这些都导致术后1年的存活率尚未超过90%,术后10年的存活率也只低于50%显然,心脏移植的进一步发展就需要更新颖的、更安全、更有效的免疫抑制剂来应用于器官移植。近年来,新的免疫抑制剂不断问世,包括IL-2受体单克隆抗体(Daclizumab,赛尼哌)、FK506(他克莫司)—能阻断依赖于白介素-2的T细胞激活和雷帕霉素(西罗莫司)—能阻断多个细胞周期的调节点。早期的临床试验都证明了这些新药具有能改善器官移植排斥的短期效果然而,长期使用这些药有相当多的毒性副作用。所以选择新的药物或者抗排斥方法,仍将是医学研究的重要方向。目的:经过多年的实验研究及临床试验,已发现多种中药具有免疫抑制作用,不过还不能代替目前临床所用的抗排斥药物。因目前所应用的抗排斥药物有着相当大的毒副作用,人们开始探讨用中药联合目前临床用的免疫抑制剂来预防移植术后的免疫排斥反应。本试验的目的是用环孢素A(正常剂量一半)联合雷公藤多甙(Glucosida Tripterygii TⅡ)作为术后的抗排斥药物,通过观察大鼠腹腔异位移植心脏的跳动时间和搏动强度及受体的血清中白介素-2的浓度,以确定抗排斥反应的效果。该实验对中药联合环孢素A等当前免疫抑制剂的研究提供了基础的研究数据,并探讨了中药抗移植排斥的作用机制,及怎样使中药在治疗移植术免疫排斥反应中得到更进一步的应用。方法:以雄性SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,将供心的升主动脉与受体的腹主动脉行端侧吻合,切除受体的左肾,将供心的肺动脉与受体的左肾静脉以自制聚乙烯管直接插入法连接。形成受体腹主动脉→供体主动脉→冠状动脉→心肌→冠状静脉→右房→右室→肺动脉→受体左肾静脉→下腔静脉的血液循环,开放血管夹,恢复供心血供。术后每日触摸腹部观察移植心脏的搏动情况,移植心脏搏动24 h以上标志移植成功。根据术后的不同处理分为3组:对照组(每天腹腔注射生理盐水),环孢素A(CsA组)(5mg/kg/d腹腔注射),CsA+TⅡ组(CsA2.5mg/kg/d+TⅡ25mg/kg/d腹腔注射)。3组受体移植术后给予腹腔注射药物至移植心停跳。观察移植心的搏动强度和跳动时间,术后第4天采血,离心取血清,-20℃恒温冻存备用,用ELISA方法测定血清中IL-2的水平。结果:CsA组及CsA+TⅡ组间移植心搏动强度的差别无统计学意义,但均明显优于对照组。CsA组及CsA+TⅡ组移植心的存活天数显著长于对照组,且两者之间无统计学差别。CsA组及CsA+TⅡ组与对照组比较血清中IL-2水平明显下降,CsA+TⅡ组比CsA组低两者之间差别有统计学意义。结论:1.雷公藤多甙具有抗移植术后免疫排斥作用。2.环孢素A同雷公藤多甙联合应用时环孢素A的剂量减半时,移植心的存活时间较单独应用环孢素A时无差别。3.环孢素A同雷公藤多甙联合应用可以减少环孢素A的用量,且更能减少血清中IL-2的含量。
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