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本文主要考察了rCHO细胞在无血清悬浮批培养、营养物限制的恒速流加培养过程中的生长代谢特性。
首先通过转瓶和2L反应器的无血清批培养，考察葡萄糖及谷氨酰胺浓度对细胞生长代谢的影响以及氨基酸的利用情况。结果表明：葡萄糖和谷氨酰胺浓度分别低于0.5及0.27mmol/L时，对rCHO细胞的生长产生较大的限制。氨浓度在6.7～8mmol/L对细胞的生长逐渐形成抑制。
其次，在2L反应器中进行了葡萄糖限制、谷氨酰胺限制、葡萄糖和谷氨酰胺双限制的恒速流加培养。结果表明：葡萄糖限制的流加培养中，葡萄糖限制阶段，葡萄糖的平均比消耗速率qGluc降为0.88mmol/109cells/day，乳酸的比生成速率PLac下降到零以下，副产物乳酸不再生成，而批培养中大约82％的葡萄糖通过糖酵解途径生成乳酸。谷氨酰胺限制的流加培养中，谷氨酰胺限制阶段，谷氨酰胺的平均比消耗速率qGln降为0.4lmmol/109cells/day，氨和丙氨酸的平均比生成速率下降到0.24和0.012mmol/109cells/day，氨的平均比生成速率仅为批培养的17％，同时谷氨酰胺转化为丙氨酸分泌到培养基中的比例后期下降到零，甚至丙氨酸从生成的氨基酸变为消耗的氨基酸。葡萄糖和谷氨酰胺双限制的流加培养中，葡萄糖和谷氨酰胺限制阶段，葡萄糖和谷氨酰胺的平均比消耗速率分别降为0.81和0.53mmol/109cells/day，乳酸、氨和丙氨酸的平均比生成速率分别下降到0.52、0.20和0.019mmol/109cells/day，代谢副产物的生成均得到了有效的控制，从而获得了最大活细胞密度。与批培养相比，三种恒速流加培养葡萄糖、谷氨酰胺限制条件下，代谢副产物乳酸、氨和丙氨酸的比生成速率大大下降，最大活细胞密度得到提高，生长阶段得到延长。