论文部分内容阅读
抗菌药在动物性食品中的残留对人体肠道菌群可能产生的不良作用已引起广泛关注。美国FDA和一些国际组织起草了相关的评估指南,但到目前为止,国际上尚未建立成熟的评价模型和方法。本实验应用离体恒化器模型主要研究了低浓度恩诺沙星对人体肠道细菌数量、耐药性、菌群结构和定植抗力的影响。
1.恩诺沙星对离体模型肠道菌群数量、耐药性和定植抗力的影响研究
离体模型接种人体肠道菌群,达到稳定状态时,总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌、肠球菌数量均与原始粪便接种物计数值比较接近(P>0.05),细菌耐药百分率低于原始粪便接种物。模型稳定后,加入恩诺沙星使系统内浓度分别达到0mg/L、0.2mg/L、2mg/L和20mg/L,持续作用8d,四套系统分别接种食品源性沙门氏菌108CFU/mL,连续接种3d以研究药物对细菌定植抗力的影响。结果表明0.2mg/L恩诺沙星对总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌、肠球菌、厌氧菌、双歧杆菌和脆弱拟杆菌的生长无影响;2mg/L和20mg/L恩诺沙星可抑制所计数细菌的生长(P<0.05或P<0.01);20mg/L恩诺沙星抑制作用更强(P<0.01);停药后,2mg/L和20mg/L恩诺沙星使总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌和肠球菌数量有增加趋势,但仍低于对照组(P<0.05或P<0.01);2mg/L和20mg/L,恩诺沙星均可降低肠道菌群的定植抗力,使菌群对外源性沙门氏菌的屏障作用下降。0.2mg/L、2mg/L和20mg/L恩诺沙星使总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率显著增加(P<0.01);停药后,总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率呈下降趋势,但与对照组相比仍处于较高水平(P<0.01)。
2.恩诺沙星对离体模型中肠道菌群结构和代谢活性的影响研究
0.2mg/L恩诺沙星对PCR-DGGE条带数和相似性略有影响(P<0.05);2mg/L恩诺沙星PCR-DGGE电泳图谱变化相对较小,但仍存在用药后某些条带消失的现象(P<0.05或P<0.01);20mg/L恩诺沙星PCR-DGGE图谱发生变化最大,用药后1~3d消失条带数最多,多态性和相似性参数降低(P<0.05);同时发现即使对照组不同采样时间DGGE图谱的条带数、多态性和相似性参数也存在一定差异。
采用气相色谱法检测培养液中乙酸、丙酸和丁酸浓度变化。结果表明0.2mg/L恩诺沙星组用药后3d、4d、7d乙酸、丙酸浓度略低于对照组(P<0.05或P<0.01):2mg/L恩诺沙星组用药后第2d、3d、6d、8d乙酸、丙酸浓度低于对照组(P<0.05):20mg/L恩诺沙星组用药后第1~8d乙酸、丙酸浓度低于对照组(P<0.05或P<0.01)。
通过以上研究,本文得出以下结论:低浓度恩诺沙星对人体肠道菌群的影响主要是抑制部分厌氧菌、总需氧和兼性厌氧菌的生长、导致细菌耐药百分率显著增加、降低肠道菌群定植抗力,对菌群结构等方面都存在不同程度的影响。