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目的(1)研究影响萤黄CH二钾盐(Lucifer Yellow CH dipotassium salt,LY)荧光强度的因素。(2)观察并分析荧光分子探针LY和磁示踪剂钆-二乙三胺五乙酸(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic,Gd-DTPA)在正常鼠和精神分裂症模型鼠海马区的扩散与分布。(3)观察并分析正常鼠和精神分裂症模型鼠中性粒细胞趋化运动能力及其差异。方法(1)应用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microsope,LSCM)研究影响LY荧光强度的因素,检测LY的荧光强度,绘制其标准曲线。(2)将健康的SD大鼠随机分为对照组和模型组,对照组大鼠经枕大池注射生理盐水,模型组大鼠经枕大池注射地卓西平马来酸盐(Dizocilpine Maleate,MK-801)进行造模。对照组和模型组再随机分别分为荧光示踪剂亚组和磁示踪剂亚组。分别在大鼠海马区注入荧光分子探针LY和Gd-DTPA。注射荧光分子探针LY0.5 h、1 h、2 h后,应用LSCM对离体脑切片进行荧光信号的采集,并使用LSCM分析软件LAS X对比分析冠状位切片中LY扩散分布的面积。应用磁共振成像仪(magnetic resonance imaging,MRI)检测Gd-DTPA在海马区的扩散和分布,利用自主研发的脑组织间隙图像处理系统测量Gd-DTPA在海马区的扩散系数(D)、清除率(K’)、体积分数(α)和半衰期(t1/2)等扩散参数。(3)将健康的昆明小鼠随机分为对照组、0.3 mg/kg MK-801模型组和0.6 mg/kg MK-801模型组,分别提取中性粒细胞,在显微镜下观察形态并计数。将每组细胞分成两份进行趋化实验,其中一份细胞加入趋化剂色氨酸-赖氨酸-酪氨酸-蛋氨酸-缬氨酸-天门冬氨酸-蛋氨酸(Trp-LysTyr-Met-Val-Met,WKYMVm)作为趋化剂处理组,即对照组1、0.3 mg/kg MK-801处理组1和0.6 mg/kg MK-801处理组1组;另一份细胞不加入趋化剂WKYMVm作为趋化剂未处理组,即对照组2、0.3 mg/kg MK-801处理组2和0.6 mg/kg MK-801处理组2。使用NIS-Elements软件记录细胞动态迁移过程。使用TAXIScan Analyzer 2软件在每组细胞中随机选取30个细胞(即n=30)分析细胞迁移的轨迹、速度和距离,并采用配对检验和单因素方差分析法进行统计学分析。结果(1)LY荧光性质稳定,荧光强度随浓度的增加而增强,且具有较好的线性关系。(2)应用LSCM可获得不同时间点荧光分子探针LY在海马区的扩散图像,与LY在正常鼠海马区的扩散比较,LY在模型鼠的海马区扩散面积小。应用MRI可获得不同时间点磁示踪剂Gd-DTPA在海马区的扩散图像,扩散参数的差异均有统计学意义;扩散分布最大面积分别为(10.26±0.61)mm2和(6.12±2.13)mm2(t=11.2,p=0.02)扩散分布最大面积差异有统计学意义。(3)与对照组的中性粒细胞比较,精神分裂症模型鼠中性粒细胞具有更强的趋化运动能力,在趋化剂的作用下,中性粒细胞具有较强的定向趋化迁移能力、迁移速度更快、距离更远。结论(1)LY的荧光稳定性较好,线性应答好,扩散特性好,不进入活细胞,可以作为生物组织成像的荧光分子探针。(2)荧光分子探针LY和磁示踪剂Gd-DTPA在精神分裂症模型鼠海马区扩散较慢。LY在模型鼠海马区的扩散面积小;Gd-DT PA在模型鼠海马区的扩散速率慢、清除速率慢、容积占比大、半衰期长、最大扩散面积小。(3)精神分裂症模型鼠中性粒细胞具有更强的趋化运动能力。