TNFR1-IgG4与EGFP-IgG4真核表达载体的表达

来源 :四川大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Zerolzx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为阳性对照,使肿瘤坏死因子受体1的抗体融合蛋白(TNFR1-IgG4)在中华仓鼠卵巢(CHO)细胞中高效表达,为TNFRl-IgG4的功能研究和临床应用奠定基础。 方法:分别以NheI和XbaI单酶切和NheI和XbaI双酶切进行pMM-TNFRl-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG鉴定。用Not I对质粒pMM-TNFR1-IgG4/WG和pMM-EGFP-IgG4/WG线性化,用Nde I对质粒pMMGR线性化。用脂质体转染法分别将以上质粒转染至CHO细胞中,经G418、透析血清筛选后得到克隆,MTX加压后进行无血清培养,用荧光显微镜观察,SDS-PACE 和WesternBlot检测它们在CHO细胞中的表达情况。 结果:将真核表达载体pMM-TNFR1-IgG4/WG、pMM-EGFP-IgG4/WG和pMMGR顺利转染至CHO细胞中,EGFP阳性克隆在荧光显微镜下均呈绿色,用Protein-Agrose层析柱成功纯化TNFR1-IgG4蛋白。 结论:EGFP基因的真核表达载体pMM-EGFP-IgG4/WG在CHO细胞中成功表达,并发出绿色荧光,因此EGFP基因是一种良好的生产分泌型外源融合蛋白的阳性对照。TNFRl基因的真核表达载体pMM-TNFRl-IgG4/WG在CHO细胞中成功表达.
其他文献
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
基于禽蛋生物反应器独特的优点,转基因鸡输卵管生物反应器已成为转基因动物和生物制药研究领域中最有活力的热点。  本研究首先分别探索了17月龄、6-9月龄以及激素刺激的雏
当有“三忆”。犹忆知晓刊物时。一九八四年入读师范后,一位要好的同学经常带我到学校的李宁夫先生家,为的是看中央电视台播出的书法讲座,向先生求教书法。有时临近中午,为了
摘要:诵读是从古代传承过来的读书方式,是我国古人阅读实践和探究的结晶,对于教师的教学有较强的借鉴价值。目前已成为我国高中语文教学的重要方式之一,也取得了显著的教学成效。本文笔者详细分析了诵读教学法在高中语文教学中的具体应用。  关键词:诵读教学法;高中语文;课堂教学  中图分类号:G633.3 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)09-0008  在目前我国高中语文诵读教学过程
光叶兔儿风(Ainsliaea glabra Hemsl.)为菊科兔儿风属植物,又名心肺草、石凤丹(四川)等;生于林缘或山坡林下的荫湿草丛中,以及沟边岩石上,海拔800~1200米,在我国主要分布于四川中南部和云南东北部。光叶兔儿风在我国为地区习惯用药,广泛用于治疗感冒咳嗽、咽喉疼痛、肠炎痢疾、泌尿疾病、风湿痹痛、跌打损伤、活血止痛等。在兔儿风属药用植物的化学成分研究中发现,该属植物中含有的倍半萜
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
本文分三个部分对我国大陆地区蜉蝣目作了系统的分类学研究。第一部分简要介绍了蜉蝣目昆虫的一般特征和世界蜉蝣目的研究简史,并比较详细地回顾了我国有关蜉蝣的历史记载和
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
摘要:通过课前预习,学生自己摸索,自己动脑,解决自己的一些基本问题。经过预习,教师教学时可以提高效率,抓紧课时进程。笔者认为,英语教学质量的高低,很大程度上取决于课前预习与否以及预习的好坏。在本文中,笔者就结合自己多年的教学实践,浅要谈谈对课前预习重要性的几点看法。  关键词:英语教学;生本课堂;课前预习  中图分类号:G632.0 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)09-0
目的:  近些年来黑色素瘤发生率不断升高,传统的治疗方法不能取得理想的治疗效果,采用免疫治疗联合传统治疗手段如化疗,激活机体免疫应答是有效治疗黑色素瘤的方法。肿瘤局部