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目的服用过量对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)可引起急性肝损伤(acute liver injury,ALI),甚至导致急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)。APAP过量不仅是大多数ALF病例的主要诱因之一,而且是一个严重的公共健康问题。氧化应激和线粒体功能障碍是APAP肝毒性的关键因素。肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)具有抗氧化和抗凋亡的作用,已证实对肝脏起保护作用。然而,ALR是否参与到APAP肝毒性的发生发展中,仍有待进一步研究。本课题拟在小鼠急性肝损伤模型中探究ALR在APAP肝毒性中的作用及机制。方法取健康雌性BALB/c小鼠,分为三个部分,探索APAP诱导的BALB/c小鼠的肝损伤模型72 h内小鼠生存率、血清ALT和AST水平、肝脏变性和坏死以及ALR蛋白水平的变化;使用ALR慢病毒(lentivirus-ALR,LvALR)过表达ALR以及三甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)干预自噬,观察其对APAP诱导的肝损伤(acetaminophen-induced liver injury,AILI)的自噬小体和自噬相关蛋白(LC3 II、p62)以及肝脏保护作用的影响;使用LvALR过表达ALR以及3-MA干预自噬,观察其对AILI氧化应激(ROS、MPO、MDA、SOD和GSH)以及线粒体功能障碍和凋亡(AIF、Cyto C、cleaved-caspase 3和TUNEL)的影响。采用APAP诱导BALB/c小鼠的肝损伤模型,用PBS溶液腹腔注射建立对照模型。各组小鼠分别在建模后做生存率、生物化学、组织学以及功能学的分析。采用生存分析法,描绘不同APAP剂量诱导的小鼠急性肝损伤的生存曲线;采用全自动生化分析仪分析血清ALT和AST水平;采用HE染色做组织学分析各组小鼠肝脏坏死程度;采用分光光度计分析肝脏组织中MPO、MDA、SOD和GSH的表达;采用电镜(electron microscopy,EM)分析肝脏组织中自噬小体数量;采用Western blot法检测肝脏组织中ALR、LC3 II、p62、AIF、Cyto C和cleaved-caspase 3的蛋白表达量;采用免疫荧光法测定肝脏组织中ROS的分布与表达量;采用TUNEL法测定肝脏组织中凋亡细胞的数量。结果第一部分,APAP剂量越大,72 h内小鼠生存率越低;血清ALT和AST水平,APAP各组显著高于Control组(P<0.05),并于APAP-24 h时达高峰;APAP各组有肝内出血和坏死,APAP剂量越大,肝内出血和坏死越严重;肝脏ALR蛋白的水平,APAP-3 h、APAP-6 h和APAP-12 h组显著高于Control组(P<0.01),APAP-24 h组开始降低,APAP-48 h组显著低于Control组(P<0.01)。第二部分,血清ALT和AST水平,生理盐水组与Lvnull组无显著差异(P>0.05);生理盐水组和Lvnull组均无肝内出血和坏死;肝脏自噬小体的数量,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组显著增加;肝脏ALR、LC3 II和p62,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组ALR表达以及LC3 II转化和p62降解显著增加(P<0.01);血清ALT和AST水平,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组有所改善(P<0.01),而LvALR+APAP+3-MA组显著恶化(P<0.01);肝内出血和坏死,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组有所改善,而LvALR+APAP+3-MA组显著恶化。第三部分,肝脏MPO、MDA、SOD、GSH和ROS的水平,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组有所改善(P<0.05),而LvALR+APAP+3-MA组显著恶化(P<0.05);肝脏AIF、Cyto C和cleaved-caspase 3,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组有所改善(P<0.05),而LvALR+APAP+3-MA组则相反(P<0.05);肝脏凋亡细胞,相比Lvnull+APAP组,LvALR+APAP组凋亡细胞显著减少,而LvALR+APAP+3-MA组显著增加。结论APAP建模72 h内,肝脏功能障碍,ALR表达先增加后减少。APAP建模后使用慢病毒过表达ALR,可增强自噬水平,改善肝脏功能,并减少肝脏氧化应激和线粒体功能障碍以及细胞凋亡。