论文部分内容阅读
目的:研究壳寡糖(COS)对体内外非酒精性脂肪模型甘油三酯(TG)的影响及作用机制。方法:在体外将1mmol/L混合脂肪酸处理的LO2细胞作为脂肪变模型组;1mmol/L混合脂肪酸及0.5mg/mL COS共同处理的细胞为COS组,同时以未处理的细胞为对照组,24 h后进行油红O染色,测细胞内甘油三酯含量。用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Western blot检测各实验组细胞固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)和肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)的mRNA以及蛋白表达情况。2mmol/L的脂肪酸诱导细胞凋亡,用Hoechst染色检测COS对细胞凋亡的保护作用。在体内将雄性C57BL/6J小鼠按体重随机分为对照组、高脂组和COS组,分别给予不同的饲料喂养,16周后取小鼠肝脏分别进行HE及油红O染色,同时测定肝脏TG含量。采用SPSS17.0软件单因素方差分析进行多组数据间的比较,进一步用SNK法进行多组的两两间比较。结果:(1)相较于对照组,模型组LO2肝细胞出现脂肪变性,细胞内脂滴增多,TG含量升高。COS处理后可以降低细胞内TG的含量。(2)模型组SREBP-1c、FAS mRNA的表达明显升高(2.306±0.239对比1.010±0.174,P<0.05;1.788±0.192对比1.006±0.139,P<0.05),而CPT1A m RNA的水平略高(1.355±0.145对比1.010±0.176,P>0.05),但差异无统计学意义。经COS处理后,SREBP-1c、FAS mRNA相对表达量(1.039±0.107、1.212±0.180,P<0.05)降低,CPT1A mRNA表达水平升高(1.911±0.773,P<0.05),差别有统计学意义。(3)模型组SREBP-1c及FAS蛋白表达和对照组、COS组相比最高(0.351±0.016对比0.206±0.012、0.161±0.081,P<0.05;1.238±0.051对比0.287±0.031、0.332±0.023,P<0.05),差异有统计学意义。COS组CPT1A蛋白的相对表达量(1.014±0.033)高于对照组和模型组(0.547±0.075、0.561±0.046,P<0.05)。(4)COS可以保护脂肪酸诱导的细胞凋亡。(5)COS能减轻高脂饮食小鼠肝脏内的脂质堆积,降低TG含量。结论:COS能减轻体内外NAFLD模型肝细胞内TG蓄积,其可能机制与抑制SREBP-1c及其下游的FAS基因表达,减少TG的合成;同时,增加CPT1A基因表达,加速TG分解有关。