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蛛丝蛋白是蜘蛛腹部丝腺中合成的一种结构特殊的纤维蛋白，因具有质量轻、韧性大、超收缩、抗张力强等优良特性，具有广泛的应用前景。蛛丝蛋白八聚体是由拟蜘蛛拖丝蛋白基因人工合成的核心序列S经翻译后连接而成的八聚体。为了深入了解8S蛛丝蛋白基因对毛发性能的作用，本实验采用原核显微注射技术，制备蛛丝蛋白八聚体转基因小鼠。通过PCR及Southern Blot检测方法鉴定阳性鼠，并通过Real-time PCR，Western Blot、免疫荧光染色等方法对转基因阳性小鼠进行表达检测。 1.蛛丝蛋白八聚体转基因小鼠的制备与鉴定 蛛丝蛋白基因对毛发性能的改善有一定的作用。为了进一步探究蛛丝蛋白基因对毛发性能的具体作用及表达规律，我们通过原核注射方法制备蛛丝蛋白基因毛囊细胞特异性表达的小鼠。用PCR及Southern Blot鉴定阳性鼠，实验共得到F0代小鼠67只，通过鉴定，我们得到阳性鼠3只，阳性率为4.47％。 本研究成功制备了蛛丝蛋白八聚体的转基因小鼠，为以后研究该基因的功能创造了实验条件。 2.蛛丝蛋白八聚体转基因小鼠表达水平的检测 成功制备转基因阳性鼠后，首先进行了mRNA水平的检测。通过Real-timePCR检测结果为:3只阳性鼠在mRNA水平都表达了目的基因，而对照鼠没有目的基因的表达。然后以α-tubulin为内参基因，进行蛋白质水平的检测，所用方法为Western Blot。检测结果为:3只阳性鼠在蛋白质水平都有目的基因的表达，对照鼠没有检测到目的蛋白。同时进行免疫荧光染色，观察目的基因蛋白在毛囊周围的表达情况。并运用绝对定量PCR法检测转基因小鼠的拷贝数，经计算，三只阳性小鼠的拷贝数分别为1.60、1.48、2.33。 通过上述检测手段，说明目的基因已经成功转入小鼠的基因组并稳定表达。本实验蛛丝蛋白转基因阳性小鼠的成功构建及检测，为下一步研究蛛丝蛋白基因对小鼠毛发性能及对其他动物毛发性能方面的作用奠定基础。