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研究目的本课题旨在筛选出适用于肿瘤热疗的微米级磁性介质并对其进行表征,考察该介质用于注射的可行性并对其进行体外细胞生物安全性研究,最后利用筛选得到的Co42A微球对肿瘤细胞进行热疗,考察该微球介导的热疗对肿瘤细胞的毒性作用。研究方法1.微米级合金粉末的筛选及表征：购买不同厂家、不同型号的合金粉末共9种,利用普通光学显微镜对其大小进行初步观察,在不同场强的交变磁场下进行升温性能的测定,筛选出Co42A微球进行后续实验。利用环境扫描电子显微镜、激光粒度分析仪g振动样品磁强计对Co42A微球进行表征,在交变磁场下测定该微球的升温性能。2.Co42A微球注射可行性研究：将筛选所得Co42A微球悬浮于不同介质并利用注射针注射,筛选出透明质酸钠凝胶作为后续悬浮介质。将微球悬于凝胶中,于交变磁场下测定其升温性能；注射入裸鼠体内,于交变磁场下测定其体内升温性能。3.Co42A微球的体外生物安全性评价：按国家标准GB/T16886.521997(细胞毒性试验体外法)制备样品浸提液,所得浸提液与小鼠成纤维细胞L-929共孵育72h,取不同时间点,镜下观察细胞形态,CCK-8检测细胞相对增殖率,评价其毒性。4.Co42A微球肿瘤细胞的体外热疗：将筛选所得微米级Co42A微球与细胞共孵育,在交变磁场下进行热疗,用CCK-8法测定细胞相对增殖率,吉姆萨染色法观察热疗后细胞形态；将微球与凝胶混悬,于交变磁场下对U251细胞进行热疗,考察该体系对热疗是否存在影响。研究结果1.微米级合金粉末的筛选及表征：筛选得到使用于肿瘤热疗的磁性介质Co42A,激光粒度分析仪显示其平均粒径为66.421μm。普通光学显微镜下观察该微球形状较为规则,粒径较为均一；环境扫描电子显微镜下观察结果表明,该微球表面光滑；振动样品磁强计显示该微球具有铁磁性。在交变磁场下的升温实验表明,该微球能够在一定时间内升温至热疗温度。2.Co42A微球注射可行性研究：筛选出透明质酸钠凝胶作为后续悬浮介质,该凝胶混悬Co42A微球后可利用注射器注射。透明质酸钠凝胶对微球的升温性能没有抑制作用,且微球在裸鼠体内升温仍然能满足热疗所需。3.Co42A微球的体外细胞毒性实验：Co42A微球对小鼠成纤维细胞L-929的形态和增殖率没有明显影响,证明其生物相容性良好。4.Co42A微球肿瘤介导细胞的体外热疗：Co42A微球介导的热疗对多种肿瘤细胞都具有明显的杀伤作用。透明质酸钠凝胶对热疗具有促进作用。结论筛选得到的Co42A微球粒径均一、形状规则,交变磁场下可升温至热疗所需温度,悬浮于透明质酸钠凝胶中可利用注射器进行注射,其生物相容性良好,可介导肿瘤细胞的磁感应热疗。