化学衍生法筛查植物中酚酸和葡萄糖醛酸苷研究

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有机酸(Organic acid)是指分子结构里含有-COOH的一类化合物,在植物的根、茎、叶等器官中广泛分布。酚酸(Phenolic acid)和葡萄糖醛酸苷(Glucuronide)是有机酸中重要的两类,具有抗氧化、抑菌等多种药理活性,在食品、医药等诸多领域被广泛应用。本文以酚酸和葡萄糖醛酸苷为研究对象,建立一种简单化学衍生-高效液相色谱-二极管阵列检测器(Chemical derivatization-High performance liquid chromatography-Diode array detector,简单化学衍生-HPLC-DAD)法。采用直接注射质谱对衍生化前后的两类有机酸进行质谱分析。将建立的方法成功应用于黄芩、蒲公英、银杏叶三种植物中有机酸的筛查。主要内容如下:1.建立一种简单化学衍生-HPLC-DAD法筛查酚酸,考察衍生化溶剂、温度、时间和催化剂的量对苯甲酸和肉桂酸两种模型化合物衍生化的影响。得出苯甲酸和肉桂酸最佳衍生化条件,将其分别用于衍生苯甲酸型酚酸(对羟基苯甲酸和没食子酸)和肉桂酸型酚酸(阿魏酸、2-羟基肉桂酸和咖啡酸),结合HPLC-DAD,为筛查酚酸提供了一定参考。通过DI-MS探究酚酸衍生化前后的质谱裂解规律,结果表明,酚酸在衍生化前会直接脱掉一个羧基,而衍生化后,会先脱掉甲氧基。酚酸质谱裂解规律的探究,能够为酚酸类物质后续研究提供一定的理论指导。2.建立一种简单化学衍生-HPLC-DAD法筛查葡萄糖醛酸苷,考察衍生化溶剂、温度、时间和催化剂的量对黄芩苷衍生化的影响。得出黄芩苷最佳衍生条件,将其用于衍生汉黄芩苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。结合HPLC-DAD,为筛查葡萄糖醛酸苷提供思路。通过DI-MS探究葡萄糖醛酸苷衍生化前后的质谱裂解规律,结果表明,衍生化前后,葡萄糖醛酸苷都是直接断裂相连的糖苷键。葡萄糖醛酸苷质谱裂解规律的探究,能够为其后续研究提供一定的理论指导。3.将建立的简单化学衍生-HPLC-DAD筛查酚酸和葡萄糖醛酸苷两种有机酸的方法,成功应用于黄芩、蒲公英、银杏叶植物中有机酸的筛查。成功筛查并鉴别黄芩提取液中9种葡萄糖醛酸苷;在蒲公英提取液中筛查出10种保留时间发生改变的物质,确认了咖啡酸和阿魏酸。将银杏叶提取液分别在不同条件下衍生,共筛查出了9种保留时间发生改变的物质,根据不同衍生化条件,推测其中可能有3种是葡萄糖醛酸苷。此方法简单、适用性广,为植物中含有羧酸这一特定官能团的筛查开辟了一种新途径。
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