链霉菌4205化感活性物质的分离鉴定

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链霉菌属(streptomyces)属于放线菌目、链霉菌科(streptomycetaceae),共约1000多种和变种。作为大多数已知抗生素和一些重要活性物质的产生菌,链霉菌属的菌株已成为生物界研究的重点。本论文主要从200个放线菌菌株中筛选具有化感活性的菌株,对其进行代谢调控,然后对发酵产物进行分离鉴定,并研究各化感物质的化感作用活性。通过比较研究各个放线菌菌株的抗菌活性和植物毒性,发现4205菌株不仅具有抗菌活性,而且还具有很强的植物毒性,其发酵液2倍稀释液对油菜和稗草根的抑制率分别达到了91.00%和98.24%,所以最终选择链霉菌属4205菌株作为目标菌株进行研究。通过活性比较,筛选出链霉菌属4205菌株的最佳氮源为玉米粉和氯化铵。以玉米粉为氮源的2倍发酵液对油菜幼苗根和苗的抑制率都达到了100%,使其完全不能生长;对稗草幼苗根和苗的抑制率分别达到了100%和93.39%,表现为根部完全不能生长,茎部溃烂变黄。以氯化铵为氮源的2倍发酵液对油菜幼苗根和苗的抑制率分别为100%和99.53%,对稗草幼苗根和苗的抑制率分别为99.53%和73.70%。 用柱色谱法从发酵4d的链霉菌属4205菌株代谢产物中分离得到24各化合物,通过波谱法鉴定了16个化合物,分别鉴定为:白环菌素(1)、12-羟基白环菌素(2)、10-羟基白环菌素(3)、11-羟基白环菌素(4)、12-羟基-7-氧-去甲基白环菌素(5)、7-氧-去甲基白环菌素(6)、2-氢-3-羟基白环菌素(7)、2,3-二氢-12-羟基白环菌素(8)、18-羟基白环菌素(9)、9-羟基-8,18-去氢白环菌素(10)、2,7,11,11,7,2-六甲基-3,8,8,3-四羟基-6,6,10,10-四烯二十二烃(11)、3,8-二甲基-9-羟基-1,2-环葵二酮(12)、间羟基苯甲酸(13)、邻羟基苯甲酸(14)、22,23,24,25-四甲基-3,4-二乙基-6,26-二羟基二十六酸(15)、2-(2,2-二甲基-3-丁醇基)-6-(16,17,18,19,20-五甲基-22-二十二醇基)4,5-二乙酸基辛二酸(16)、2-乙基-3-羟基-1-己醇(11)。化合物5、7、8、10、11、12为6个新化合物。化合物1~10为10个白环菌素(albocycline)类大环内酯化合物。 对各个单体化合物的抗真菌测定结果表明,albocycline、11-hydroxyalbocycline、7-O-demethylalbocycline这3个大环内酯类化合物对白色念珠菌(细菌)具有较好的活性。albocycline的IC50、MIC分别为1.50mg/ml和10.00mg/ml;11-hydroxyalbocycline的IC501.00mg/ml;7-O-demethylalbocycline的IC50、MIC分别为1.00mg/ml和10.00mg/ml。
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