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研究目的:
本研究通过建立大鼠运动模型,模拟运动员训练模式,旨在观察运动性免疫抑制发生发展过程中胸腺细胞周期G1/S期和G2/M期各调控蛋白的变化特征及其相互关系,探究运动影响细胞免疫功能的机制。
研究方法:
6周龄SPF级雄性SD大鼠80只,适应性饲养一周后,随机分为安静对照组和运动组,每组40只。运动组进行持续6周递增负荷跑台运动,坡度为0,每次运动30min,每周运动6次。适应性运动训练1周,跑台速度为10m/min,定为第0周。正式训练第1周运动负荷为10m/min。第2周起始负荷定为20m/min。以后每周递增负荷5m/min,至第6周达到40m/min。通过免疫组织化学方法检测细胞周期蛋白CyclinE、p21和cyclinB1阳性表达情况。
研究结果:
1、六周递增负荷运动过程中大鼠胸腺细胞CyclinE的变化
六周递增负荷运动过程中,2周时CyclinE较0周略有增加,但不显著;4周时明显减少,与0、2周比均具有非常显著性差异(P<0.01);6周较4周明显增加(P<0.05),但表达水平仍低于0周和2周。
2、六周递增负荷运动过程中大鼠胸腺细胞p21的变化
以0周时胸腺细胞p21阳性表达为参照,2周时p21表达显著增加(P<0.01),4周时较2周急剧减少(P<0.01),至6周时略有增加但仍表达较少且6周时大鼠胸腺皮髓质界限发生交叉融合。
3、六周递增负荷运动过程中大鼠胸腺细胞CyclinB1的变化
大鼠胸腺细胞CyclinB1在六周递增负荷运动过程中第2周阳性表达甚于第0周;4周组CyclinB1阳性表达较2周组下降;到了第6周,CyclinB1阳性表达略有增多,且由图可见,胸腺髓质较前几周缩小。各周CyclinB1表达量之间的变化趋势平稳,且均无显著性差异。
研究结论:
1、六周递增负荷运动过程中,2周时大鼠胸腺细胞周期G1/S期的调控以负性调节因子p21的上调为主要特征,可能出现G1/S期阻滞,影响细胞周期运转;4周时,正性调节因子CyclinE由于运动负荷的增加无法维持其水平而大幅下降,并伴随着细胞周期抑制蛋白p21大幅回落,从而维持机体平衡,使得细胞周期的破坏得以缓解;6周时,以CyclinE的回升为主导,p21虽也有上升但仍不及CyclinE的表达,细胞周期运转改善,但胸腺整体的萎缩仍可能造成免疫机能的下降。
2、随着六周递增负荷运动过程的推进,大鼠胸腺细胞CyclinB1表达呈现先上升后下降的变化趋势,可能是机体对运动负荷应激的适应性调节。
3、CyclinB1受递增负荷运动影响不及CyclinE明显。可见长期递增负荷运动主要通过在G1/S期的调控造成DNA复制障碍,阻滞胸腺细胞周期。