贝伐单抗抑制碱烧伤角膜新生血管的实验研究

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目的:评价结膜下注射贝伐单抗(bevacizumab)对碱烧伤大鼠角膜新生血管化的影响;比较碱烧伤后不同时间用药对治疗效果的影响,探讨最佳给药时间,为该药的临床应用提供实验依据。方法:将36只成年雄性Wistar大鼠,碱烧伤诱导右眼单眼角膜新生血管模型后,随机分为3组:实验1组、实验2组和对照组,每组12只动物(12只眼)。实验1组每只动物分别于碱烧伤后第1d、第3d及第5d,右眼结膜下注射贝伐单抗原液(25 mg/ml)0.02ml;实验2组每只动物分别于碱烧伤后第3d、第5d及第7d,右眼结膜下注射贝伐单抗原液(25mg/ml)0.02ml;对照组每只动物分别于碱烧伤后第3d、第5d及第7d,右眼结膜下注射0.9%氯化钠注射液0.02ml。所有动物均于碱烧伤后24h开始,给予氧氟沙星滴眼液点右眼,每日4次。分别采用裂隙灯下观察并测量新生血管长度以计算新生血管化面积、显微镜下记录新生血管数及免疫组织化学染色检测血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达三种方法,研究角膜新生血管的形成及抑制情况。结果:1.裂隙灯显微镜观察结果:两实验组与对照组比较,新生血管发生较迟、生长缓慢、新生血管化面积小。对照组新生血管化面积占全角膜面积的百分比为(66.90±12.57)%,与两实验组比较,差别均具有统计学意义(P<0.001);实验1组为(27.70±12.60)%较实验2组的(41.60±12.70)%小,差别具有统计学意义(P<0.05)。2.显微镜下新生血管计数:对照组新生血管数(个/400倍视野)为8.13±1.57、实验2组为3.16±1.36、实验1组为2.02±1.17。两实验组与对照组比较,P<0.001;两实验组之间比较,P<0.05,差别均具有统计学意义。3.免疫组化结果:对照组VEGF阳性表达平均灰度值为126.28±7.33,较两实验组增强,差别具有统计学意义(P<0.001);实验2组(108.67±4.74)较实验1组(101.53±6.80)VEGF阳性表达平均灰度值增加,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.结膜下注射贝伐单抗可有效抑制碱烧伤大鼠角膜新生血管的增殖,并可减少角膜组织VEGF的表达。2.贝伐单抗可抑制己形成的角膜新生血管牙的增殖,且早期用药效果更好。
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