月季花中抗氧化性化学成分的分离与结构鉴定

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月季花是蔷薇科蔷薇属植物月季的干燥花蕾或初开放的花,富含多种药用和营养成分,具有多种食疗保健和药理功效。我国月季资源丰富,对其活性物质进行系统的基础研究和深层次开发,具有重要的经济价值和社会意义。本课题采用DPPH清除法对月季花的不同极性溶剂萃取部分的抗氧化活性进行研究,了解月季花中抗氧化成分的分布情况,并据此有目的地分离月季花中高效的抗氧化活性化学成分,为月季花的深层次开发奠定基础。目的1.测定月季花的总黄酮含量。2.比较月季花乙醇提取物中极性梯度萃取所得各萃取部分清除DPPH的活性。3.分离对DPPH清除作用最强的萃取部分,得到若干单体化合物,鉴定其化学结构,观察其清除DPPH的能力。方法1.月季花低温烘干、粉碎,用95%乙醇热回流提取,紫外分光光度法测定总黄酮含量。2.依前法大量提取月季花得醇浸膏,采用梯度极性溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇)萃取进行初步分离。用DPPH清除法观察各萃取部分的抗氧化活性,选择活性最强的部分首先分离。3.采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、聚酰胺、MCI等柱色谱方法对首要分离部分中的化学成分进行分离纯化,得到若干单体化合物,根据NMR数据鉴定结构,通过DPPH清除法观察抗氧化活性。结果1.月季花的总黄酮含量为(6.115±0.050)%(芦丁当量)。2.各萃取部分清除DPPH的能力大小依次为:抗坏血酸>乙酸乙酯萃取部分>正丁醇萃取部分>水溶性部分≈乙醇提取物>氯仿萃取部分>石油醚萃取部分,确定乙酸乙酯萃取部分为首先分离部分。3.从月季花乙酸乙酯萃取部分中分离得到十个单体化合物,分别为:3,4,8,9,10-五羟基二苯并[b,d]吡哺-6-酮(1)、槲皮素(2)、山柰酚(3)、3,5,7,4’-四羟基-8-甲氧基-黄酮(4)、异槲皮苷(5)、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、银椴苷(7)、山柰酚3-O-(6"-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(8)、山柰酚3-O-(2",6"-二没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(9)、槲皮素3-O-(2",6"-二没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(10)。其中,化合物1为香豆素类化合物,其余九个均是黄酮类化合物。化合物1、4、7、8、9、10为首次从月季花中分离得到。十个单体化合物清除DPPH的能力大小依次为:10>9>1≈8>5>抗坏血酸≈2>6>7>3>4。结论1.月季花中黄酮类化合物的种类和含量丰富。2.从月季花乙酸乙酯萃取部分分离纯化得到十个化合物,除化合物1属香豆素类外,其余九个均是黄酮类化合物。其中,化合物1、4、7、8、9、10为首次从月季花中分离得到。3.月季花具有较强的抗氧化作用,以中等极性萃取部分(乙酸乙酯部分)最显著。从该部分分离纯化得到的十个抗氧化性化合物中,九个是黄酮类化合物,说明月季花的抗氧化作用主要依赖于其所含的黄酮类化合物。化合物1、8、9和10表现出较显著的抗氧化能力。
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