髓过氧化物酶水平和基因多态性与冠心病的关系及其作用机制的初步探讨

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目的研究髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)水平及其-463位G/A基因多态性与冠心病的关系,通过研究MPO与中性粒细胞(PMN)表面CD11b/CD18的关系以及MPO抑制剂对PMN和内皮细胞粘附率的影响,初步探讨MPO的作用机制。方法采用病例-对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymerse, PCR-RFLP)技术检测157例冠心病患者(冠脉造影显示至少有一支血管狭窄≥50%)和78例对照者(冠脉造影未发现任何可辨认斑块或狭窄)的MPO-463位基因型;以ELISA法检测血浆MPO水平;采用免疫比浊法测定血浆hs-CRP水平;免疫荧光法测定血浆cTnI水平和PMN表面CD11b/CD18的表达;应用白蛋白钴结合试验测定血浆IMA水平;以粘附实验测定PMN与ECV304细胞间的粘附率。结果1.冠心病组血浆MPO水平(332.05±167.56pg/ml)高于对照组MPO水平(277.81±142.68pg/ml),差异有统计学意义(t=2.59 , P=0.011<0.05 )。2. MPO-463位G/A多态性有3种基因型(GG,GA,AA),两组间基因型分布和等位基因频率分布差异有统计学意义(P均<0.05)。GG基因型者发生冠心病的危险性较AA基因型者显著增高(OR=4.070, 95%CI=1.472-11.253,P<0.01);GG+GA基因型在病例组和对照组中的分布频率分别为95.5%(OR=3.518,95%CI=1.307-9.472)和85.9%。MPO各基因型个体的MPO水平在冠心病组高于对照组(P<0.001)。冠心病组中GG基因型个体的MPO水平均高于GA(P=0.007<0.05)和AA基因型的个体(P=0.002<0.05),而GA基因型与AA基因型个体的MPO水平之间的差异没有统计学意义(P=0.661)。3. AMI组PMN与内皮细胞的粘附率明显高于对照组的粘附率[(47.63±10.16)%比(8.82±2.63)%,P<0.01],抗CD11b抗体和MPO抑制剂ABAH(10μM、20μM)可明显降低患者PMN与内皮细胞的粘附率(P<0.05)。结论1. MPO水平可能与冠心病发病有关。2.MPO-463位基因多态性与冠心病有关,它可能是冠心病发病中的一个遗传因素,等位基因G影响冠心病组个体的MPO水平。3. MPO抑制剂ABAH可抑制PMN与内皮细胞的粘附性,可能与ABAH影响PMN表面CD11b/CD18表达有关。
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