【摘 要】
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由变应原引起的过敏性哮喘在免疫学上属于Ⅰ型超敏反应,目前对该病的机制及新的治疗手段的研究主要集中在变应原的表位的确定上.噬菌体呈现技术就是在噬菌体衣壳蛋白上表达一
【出 处】
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白求恩医科大学 吉林大学白求恩医学部 吉林大学
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由变应原引起的过敏性哮喘在免疫学上属于Ⅰ型超敏反应,目前对该病的机制及新的治疗手段的研究主要集中在变应原的表位的确定上.噬菌体呈现技术就是在噬菌体衣壳蛋白上表达一段长度固定序列随机的小肽.根据亲和力选择的原理将与配基亲和力最高的小肽序列筛选出来,并进一步研究其生物学活性.该文将该技术用于变应原的核心表位的确定的研究中,取得了一定的效果.为了更好地从噬菌体肽库中筛选出的小肽是否具有生物学活性,作者建立了昆明鼠过敏性哮喘模型.利用特异性抗OVA血清筛选噬菌体随机15肽库,经过三轮筛选后,随机挑取80单菌落,通过两种ELISA法检测,得双阳性克隆43个.经提取单链共得单链DNA 40条.对其中32条进行DNA序列分析,可准确读出的单链12条.由DNA序列反推出氨基酸序列发现这些序列中均富含有脯氨酸,并且可以在其中确定保守序列.在此基础上利用固相多肽合成技术合成了一个8个氨基酸的小肽段.该序列不在OVA的一级结构上,可能是一个比OVA与抗体亲和力更高的OVA核心表位类似物.在动物模型建成和肽库筛选成功的基础上,研究小肽对小鼠过敏性哮喘模型的治疗作用.实验结果表明;1.可利用噬菌体肽库筛选变应原的核心表位类似物;2.该实验所得到的具有活性的小肽的氨基酸序列中脯氨酸出现的频率最高,支持了关于抗体识别抗原的过程中存在有公共表位而该表位富含脯氨酸的假说.
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