【摘 要】
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该研究将鸡Leptin重组蛋白和牛血清白蛋白(BSA)分别制成终浓度为1mg/mL的油乳剂疫苗,选择20只40周龄的黄羽肉种鸡,随机分成两组,每组10只,分别在试验的第3、31、63和84天进行
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该研究将鸡Leptin重组蛋白和牛血清白蛋白(BSA)分别制成终浓度为1mg/mL的油乳剂疫苗,选择20只40周龄的黄羽肉种鸡,随机分成两组,每组10只,分别在试验的第3、31、63和84天进行四次免疫,注射剂量处理组为1mg鸡Leptin重组蛋白/只,对照组为1mg BSA/只,整个试验为期100天.试验期间记录每天产蛋情况,每10天测一次采食量,每两周称一次体重.结果表明:第一次和第二次免疫后处理组和对照组产蛋率没有显著差异(p>0.05),第三次和第四次加强免疫后处理组产蛋率比对照组低约50%,差异显著(p<0.05);处理组的采食量低于对照组,但没有形成显著差异(p>0.05);免疫鸡Leptin重组蛋白后体增重略高于对照组,但差异不显著(p>0.05);将试验鸡进行屠宰,分离并称腹脂重,结果表明处理组平均每只鸡腹脂沉积为115.60±15.07g,显著高于对照组的77.98±5.70g(p<0.05).该研究在第三次免疫后开始收集鸡蛋,通过去除卵黄中脂肪来粗提抗Leptin IgY,并对粗提液进行ELISA检测.随机选择12只50日龄黄羽肉母鸡分成两组,处理组注射浓缩的卵黄提取液(总蛋白浓度为8.5mg/mL)1mL/只,对照组注射生理盐水1mL/只.结果发现被动免疫后6小时内,即2、4、6小时处理组的累积采食量显著高于对照组(p<0.05或p<0.01),但全天累积总采食量在处理组和对照组差异不显著(p>0.05),第二天同样观察到免疫抗Leptin粗提液能在短期内促进采食量,但趋势比第一天明显下降,免疫后第3天对鸡进行翅静脉采血,检测抗Leptin抗体水平,结果表明虽然处理组抗体水平显著高于对照组(0.88±0.04 vs 0.37±0.07,p<0.01).该研究利用鸡Leptin重组蛋白对鸡进行免疫来检测鸡Leptin的生物学作用.通过免疫中和方法证实Leptin具有影响鸡采食、脂肪沉积和参与调节繁殖活动的一系列生物学功能,再次解答了禽类Leptin基因存在与否的问题以及对Leptin功能方面的一些疑问.
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