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干扰素能干扰病毒的合成与复制,是机体抗病毒感染的第一道防御系统。干扰素在哺乳动物中已进行了深入的研究,禽类干扰素的研究也已经取得了很大的进展。尤其在鸡和鸭干扰素的研究领域,但鹅干扰素的研究在国内外尚未见相关报道。 本实验参考GenBank发表的鸭α干扰素（DuIFN-α）及鸭γ干扰素（DuIFN-γ）全序列,应用Oligo 4.1及Primer Premier 5软件在其完整的阅读框架外设计上、下游引物及反转录引物,采用RT-PCR方法扩增得到一段大约600bp的IFN-α DNA片段;一段大约500bp的IFN-γ DNA片段。将两个片段分别克隆至pMD18-T载体,进行序列测定和分析,结果表明:克隆的鹅α干扰素（GoIFN-α）基因开放阅读框包括576bp,编码蛋白为191个氨基酸,N末端的30个疏水性氨基酸是信号肽,成熟的多肽由161个氨基酸组成,同GenBank上公布的鸭α干扰素（DuIFN-α）基因在核苷酸水平上的同源性为96.70%,氨基酸序列的同源性为93.72%。鹅γ干扰素（GoIFN-γ）基因的开放阅读框包括495bp,编码含有164个氨基酸的多肽,其中N末端的19个氨基酸残基可能为信号肽序列,成熟多肽为145个氨基酸。将克隆的GoIFN-γ的基因序列与GenBank上已公布的鸭γ干扰素（DuIFN-γ）基因序列相比较,核苷酸序列同源性为94.95%,氨基酸序列的同源性为93.29%。GoIFN-α与GoIFN-γ相比,核苷酸水平的同源性仅为31.26%,氨基酸水平的同源性为6.22%。将两段基因序列分别与鸡、犬和人的α及γ干扰素基因进行同源性比较,在核苷酸及氨基酸的同源性都很低。 将两种GoIFN基因特异性的亚克隆到表达载体pGEX-6p-1上,重组质粒转化大肠杆菌TGI和BL21（DE3）PlysS,经1.0mmol/L IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE检测,得到大约44ku和40ku的融合蛋白,与预期的相符。将GoIFN-γ基因特异性的亚克隆到表达载体pET-30a的EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点上,重组质粒转化大肠杆菌TGⅠ和BL21（DE3）PlysS,也经1.0mmol/L IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE检测,得到大约18ku的融合蛋白,与预期的相符。 本实验结果为进行鹅干扰素生物制剂的研究奠定了基础,同时也为禽类干扰素的研究开辟了一个新领域。