MEF的永生化及永生化细胞系的特性分析

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该项研究的目的是希望将小鼠胚胎成纤维细胞永生化,如能筛选出有正常饲养层功能的克隆,将会为ES细胞的常规维持提供经济和方便的饲养层.通过磷酸钙沉淀法将SV40-T基因导入小鼠胚胎成纤维细胞,得到7个永生化的细胞系.它们在形态和生长特性上各有不同,染色体变异十分明显,RT-PCR测定表明7个永生化细胞系中有3个有白血病抑制因子的表达.ES细胞克隆形成实验结果表明,各永生化细胞系饲养层上ES细胞克隆形成率显著低于原代小鼠胚胎成纤维细胞,所以不适于作为ES细胞培养的饲养层,ES细胞培养传代实验也进一步证实了该结论.该文对可能的原因及该方法应用前景进行了讨论.
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