【摘 要】
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雌酮、雌二醇和雌三醇是三种主要的内源性雌激素,不仅具有很强的生理功能而且具有非常重要的临床应用价值.雌激素含量的测定广泛应用于疾病的诊断和治疗、雌激素的补充、预测
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雌酮、雌二醇和雌三醇是三种主要的内源性雌激素,不仅具有很强的生理功能而且具有非常重要的临床应用价值.雌激素含量的测定广泛应用于疾病的诊断和治疗、雌激素的补充、预测排卵和诊断怀孕等.目前,临床上主要是采用放射免疫分析法(RIA)进行检测.RIA法的优点是灵敏度高、特异性强,但RIA法使用放射性同位素,容易对环境造成污染.该文的研究工作是将雌激素检测与免疫分析法有机结合,利用毛细管电泳等技术对雌激素的非放射免疫分析方法进行了研究.论文包括以下几个部分:第一章 概述了毛细管电泳研究进展,介绍了毛细管电泳的发展进程、分离模式、检测技术和应用研究.第二章 通过复苏杂交瘤细胞株得到了三种雌激素(雌酮、雌二醇和雌三醇)的单克隆抗体,抗体纯化后应用于雌激素的检测;将温敏水凝胶稀释后作为毛细管电泳的分离介质,利用毛细管电泳技术结合激光诱导荧光检测器,采用标记抗原的竞争免疫分析模式,分别建立了毛细管电泳免疫分析血清中雌酮、雌二醇和雌三醇的方法.第三章 选择雌二醇C-17位的羟基作为偶联位置合成全抗原,制备了能特异性识别三种雌激素的多克隆抗体.用ELISA方法测得的抗体的终点效价为1:10<6>,说明所合成的抗原具有很强的免疫原性;测得抗体与固定化抗原的亲和常数为6.88×10<8>L/mol,说明抗体的免疫反应性很强,可以用于免疫分析.第四章 优化了电泳分离条件,考察了两种胶束体系对三种雌激素分离结果的影响,最终选择10mmol/L pH9.2硼砂缓冲溶液作为电泳缓冲液,建立了胶束电动毛细管色谱法分离三种雌激素的方法.
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