中国黑小麦低分子量麦谷蛋白亚基的基因克隆及序列分析

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuefu2008
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低分子量麦谷蛋白亚基(low molecular weight glutenin subunit,LMW-GS)是小麦籽粒贮藏蛋白的重要组分,其组成和数量直接影响和决定着小麦的加工品质。分析中国黑小麦中的LMW-GS,对普通小麦品质育种上有重要的理论和应用价值。  本文根据已发表的LMW-GS基因的序列比对结果设计了扩增低分子量谷蛋白基因完整编码区的简并引物,采用PCR方法从中国黑小麦76中分离出3个低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)基因,命名为LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3。推导氨基酸序列比较显示,LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3之间的相似性为72.32%,在N-末端重复区部分和C-末端区中存在着差异。其主要结果如下:  1.根据已发表的 LMW-GS基因的序列比对结果设计了扩增低分子量谷蛋白基因完整编码区的简并引物对中国黑小麦76的总DNA进行扩增获得了约900 bp左右的DNA片段,与预期的低分子量麦谷蛋白基因编码区的长度接近。  2.克隆并测序后获得3个不同的亚基基因 LMW-GS76-1、LMW-GS76-2和LMW-GS76-3。LMW-GS76-1编码区全长897bp,编码298个氨基酸;LMW-GS76-2编码区全长924bp,编码307个氨基酸;LMW-GS76-3编码区全长966bp,编码321个氨基酸。其在N、C端核苷酸的组成上存在保守性,具有LMW-GS基因的典型结构特征。  3.序列比较分析显示,这3个序列与小麦族物种的低分子量麦谷蛋白亚基基因序列有较高的一致性。分析表明,LMW76-1和LMW76-2可能是由Glu-D3位点编码的。LMW76-3可能是由Glu-A3位点编码的。
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