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[目的]观察外周血CD4+CD25+调节性T细胞之特异性发育和功能基因Foxp3 mRNA在肾虚型再生障碍性贫血患者中的表达水平及其与肾阴虚、肾阳虚证证侯的关系,探讨Foxp3介导的免疫负调控缺陷在再障中医肾虚病机和免疫发病机制中的重要意义,为中医补肾法治疗再障提供科学的理论根据,并为进一步提高补肾中药治疗再障的疗效寻找新的作用靶点。
[方法]分别采用全自动血液分析仪、流式细胞仪分析技术和实时荧光定量逆转录多聚酶链反应法(RQ-PCR)测定肾虚型再生障碍性贫血患者外周血全血细胞计数、CD4+CD25+T细胞表达率和单个核细胞Foxp3mRNA表达水平,结合再障中医证侯分级积分量表问卷调查的方法研究Foxp3mRNA在肾虚型再障的表达规律及其与肾阴虚、肾阳虚证证侯积分的关系和疗效预后的关系。
[结果]①CD4+CD25+T细胞表达率和Foxp3mRNA水平在健康人群和所有再障组患者中表达无统计学差异性,但再障中HGB＜90g/L组患者的Foxp3mRNh表达水平明显低于健康对照和HGB≥90g/L再障组(P＜0.05和P＜0.05)。②96.6％(28/29)的再障患者有肾虚表现,90％(26/29)的患者兼有肾阴虚和肾阳虚证表现。③肾虚型再障Foxp3mRNA低表达组肾虚证候、肾阴虚证候积分均明显高于Foxp3mRNA高表达组(P＜0.001和P＜0.001),且Foxp3mRNA低表达组肾阴虚证候积分高于肾阳虚证候积分(P＜0.05)。④Foxp3mRNA表达水平与肾虚型再障患者外周血HGB含量、WBC和血小板计数均呈正相关关系(r=0.68,0.53和0.47)。⑤肾虚型再障Foxp3mRNA低表达组患者治疗有效比例明显低于高表达组。
[结论]①调节性T细胞发育与功能基因Foxp3 mRNA表达参与再障的免疫发病机制。②再障患者绝大多数有肾虚证候且兼具肾阴虚、肾阳虚证表现,又一次证实了再障的肾虚本质,为中医采用补肾为主和“阴阳互求”的方法治疗再障提供了科学依据,我们制定的再障中医证候分级积分量表应用于再障的临床辨证分型,是一个简便可行、客观可靠的方法。③再障患者Foxp3mRNA低表达与中医的肾虚证候尤其肾阴虚证候表现有关,Foxp3作为机体在免疫反应中承担免疫负调控作用的主要掌控基因,其表达或代偿能力缺陷与中医的“肾虚”病机正好不谋而合。④再障患者Foxp3mRNA水平与骨髓三系造血均呈正相关,高表达者血细胞减少程度较轻、肾虚证候表现较少、治疗有效率较高,可以作为肾虚型再障采用中医或中西医结合治疗的一个疗效预测或预后判断的有用指标。