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目的:Rhesus血型(简称Rh血型)因其抗原众多、变种各异和临床疾病相关性而备受重视。该血型系统中与临床疾病关联最密切的抗原即RhD抗原具有较高的免疫原性。RhD阴性围产期妇女产生抗D抗体后所导致的溶血性疾病会使患儿受到严重伤害。本课题研究山东地区汉族RhD阴性围产期妇女RhD抗原的基因分型及RhD抗原同种免疫状况,寻找D抗原免疫的具体特点,并针对RhD阴性围产期妇女这些同种免疫的特点制定不同的检测和防治策略。方法:详细记录2012年全年1017例围产期妇女的孕产史。1.首先鉴定患者及丈夫的ABO和RhD抗原。2.对筛查为Rh阴性血型的血样,采用间接Coombs试验(IAT)进行确认,以排除D抗原变种。3.对IAT试验认定为RhD(-)的样本,继续采用吸附洗脱试验(absorb-elute test)验证其是否为DEL型,并以PCR分子生物学方法在基因水平上确定是否为弱D型、部分D型或Del型。4.对患者夫妇进行不规则抗体的初步筛查、抗体特异性鉴定和抗体强度检测。结果:1.1017例围产期妇女标本中,266例经血清学初筛鉴定为RhD阴性,采用抗人球蛋白方法、吸收放散实验和PCR-SSP(聚合酶链反应-序列特异性引物)方法进一步鉴定其RhD抗原,结果显示其中56例确认为DEL型,9例为弱D型或部分D型。2.所有初筛为RhD阴性的孕产妇中,共有15例患者产生了抗D抗体,本组调查中RhD阴性孕产妇抗D抗体产生的比例为5.64%。3.15例产生抗D的RhD阴性孕产妇中,夫妇ABO血型相合者所占比例(86.7%)明显高于夫妇ABO血型不相合者(13.3%,P<0.05)。4.经血清学及分子生物学方法鉴定,15例产生抗D的RhD阴性孕产妇均排除DEL表型。结论:1.RhD阴性孕产妇RhD抗原同种免疫的发生受孕产史、夫妇ABO血型、RhCcEe表型、是否为DEL型等多种因素的影响,夫妇ABO血型相合、怀孕生产次数增加、孕妇非DEL型等因素显著增加RhD阴性围产期妇女产生抗D抗体的可能性。2.DEL型孕产妇产生抗D的几率较低,因此可免去定期的产前抗-D检测及预防性抗D免疫球蛋白的使用。3.及时检测围产期孕妇的RhD血型及抗体,可对RhD HDFN的及时治疗提供重要依据。