新型荧光DNA探针微观结构控制研究

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本论文以CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子作为能量供体,金纳米粒子作为能量受体,通过对DNA模板法的合理设计和运用,以碱基互补配对为原则,成功实现了对探针微结构的控制,初步得到了能量供受体比例为1∶2;1∶1;2∶1的新型荧光DNA探针。  论文的第一章介绍了基于荧光共振能量转移(FRET)和DNA碱基互补配对原则的新型荧光DNA探针的原理,研究进展及发展趋势,并且对作为能量受体的金纳米粒子和作为能量供体的量子点的性质,制备方法及在生物传感器中的应用作了介绍。  论文的第二章对金纳米粒子表面DNA的数目和位置进行了控制研究。采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备了金纳米粒子,加入BSPP提高其稳定性,探究出了既能保持稳定又能最大限度提高连接效率的NaCl的浓度,得到在0.5×TBE缓冲液中,NaCl浓度为50mmol/L,巯基DNA与金纳米粒子摩尔比为2∶1时,通过设计DNA模板可以得到特定位置2个单链巯基DNA修饰的金纳米粒子。  论文的第三章在水相中制备了CdTe量子点并且用反相微乳液法成功制备了CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子,用APTES和丁二酸酐将其表面修饰上羧基,对羧基化的条件进行了优化控制。当CdTe/SiO2的量为0.2g时,加入1.5mL的APTES可以得到最优的氨基化CdTe/SiO2,再加入0.3g丁二酸酐反应8h得到的羧基化效果最好。  论文的第四章通过对DNA模板的合理设计和使用,初步实现了对探针微观结构的控制。能量供体羧基化的CdTe/SiO2与氨基修饰的单链DNA相连,使用EDC和NHS促进这个过程中的酰胺反应,能量受体金纳米粒子与巯基修饰的单链DNA相连。通过将能量供体连接氨基DNA模板可以得到供受体比例1∶2和1∶1结构的探针,将能量受体与巯基DNA模板相连可以控制得到供受体比例2∶1的探针结构。由此初步制备出了能量供受体为1∶2;1∶1和2∶1的探针结构。
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