新型自组装短肽对子宫创伤修复的作用研究

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本文运用手性自组装短肽Sciobio-Ⅱ与Sciobio-Ⅲ构建细胞三维培养模型来研究大鼠子宫创伤修复的效果。理化性质部分:通过圆二色谱仪分析手性自组装短肽的二级结构;刚果红染色观察短肽自组装宏观过程;原子力显微镜分析两种短肽自组装 24 小时前后的微观形变;细胞实验部分:建立两种子宫细胞系(Hela细胞与RL95-2细胞)的三维培养体系,通过CCK-8实验检测细胞在短肽中的细胞活性;AO/EB染色观察细胞生长状态;实时荧光定量PCR检测细胞相关mRNA表达水平;动物实验部分:红细胞裂解实验检测短肽对细胞膜的裂解作用;建立大鼠子宫创伤修复模型中,并在修复过程中引入手性自组装短肽;利用 HE 染色和免疫组织学染色及半定量分析其在子宫创伤修复过程中的影响。理化检测结果显示,在 25℃与 37℃下短肽 Sciobio-Ⅱ 与Sciobio-Ⅲ的二级结构均为稳定的β折叠,两种短肽呈现镜像相关;手性自组装短肽可在盐离子触发下自发组装形成致密的膜样结构;可为细胞培养提供一定的力学支撑;细胞实验结果:Hela 细胞与 RL95-2细胞均可在短肽形成的水凝胶环境中良好生长,与普通贴壁培养相比,在实验第五天短肽组细胞仍然保持持续生长,子宫修复相关mRNA表达水平明显高于对照组。动物实验部分:通过红细胞裂解实验,证明短肽Sciobio-Ⅱ与Sciobio-Ⅲ在自组装前后均对细胞膜无裂解作用;其次建立模拟临床上人工流产术的过程,建立SD大鼠假孕模型与子宫创伤模型。HE结果显示,与对照组相比短肽组可明显缩短子宫修复时间;免疫组织化学结果显示短肽Sciobio-Ⅱ与Sciobio-Ⅲ可促进损伤区域修复相关因子的表达,促进基底新生腺体与微血管生成,加速整个修复过程。手性自组装短肽作为一种新型纳米纤维支架材料,可在子宫创伤治疗方面提供新的思路与方向。
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