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植物内生菌可产生丰富的生物活性物质,是开发新型生物农药的天然资源宝库。本文从3种禾本科植物野生日本看麦娘(Alopecurus japonicas Steud.)、草地早熟禾(Poa pratensis L.)、狗牙根(Cynodon dactylon (Linn.) Pers.)等的根、茎、叶中分离内生菌,并测定其对小麦赤霉病菌的抑菌活性,旨在筛选出对小麦赤霉病菌有抑菌活性的内生菌,为进一步开发防治小麦赤霉病的生物药剂奠定基础。主要研究结果如下：(1)采用匀浆法和组织块培养法从3种野生禾本科杂草中共分离得到68株内生菌,其中内生真菌31株,内生细菌28株,内生放线菌9株。通过对小麦赤霉病菌的抑菌活性实验,筛选得到6株活性内生菌,分别为看麦娘内生真菌KMN-1和KMN-11,看麦娘内生细菌KMN-7、KMN-12、早熟禾内生细菌CPC-5,早熟禾内生放线菌CPC-3,其中看麦娘内生真菌KMN-1菌株和KMN-1 1菌株活性最强,对小麦赤霉病菌的菌丝生长抑制率分别为71.00%和85.14%。(2)通过离体和活体试验,系统研究了内生真菌菌株KMN-1和KMN-11的杀菌活性。离体穗部试验测定结果表明,2株看麦娘内生真菌对小麦赤霉病菌的菌丝生长具明显的拮抗作用,KMN-1和KMN-11菌株的发酵液抑制小麦赤霉病菌菌丝生长的EC50值分别为6572.97 mg·L-1 5218.34 mg·L-1(按发酵液中干物质量计算)。进一步通过离体麦穗和田间小区实验,系统研究了KMN-1和KMN-11发酵产物对小麦赤霉病的防治效果,结果表明KMN-1和KMN-11对小麦赤霉病均表现较好的防治作用,在离体麦穗上,KMN-1发酵产物对小麦赤霉病的保护和治疗作用防治效果分别为78.13%、76.52%,KMN-11发酵产物对小麦赤霉病的保护和治疗作用防治效果分别为54.69%、57.58%。在小区生防试验中,2株内生真菌代谢产物也可降低小麦赤霉病的发病程度,喷施菌株KMN-1发酵液,对小麦赤霉病的保护和治疗作用防治效果为52.76%、40.72%,菌株KMN-11的发酵液对小麦赤霉病的保护和治疗作用防治效果为45.71%、32.26%。(3)通过形态学及分子生物学等方法,对菌株KMN-1和KMN-11进行了鉴定。结果表明,菌株KMN-.1与细极链格孢(Alternaria tenuissima)、链格孢(Alternaria alternaria)的相似度均高达100%,再结合菌落、显微形态特征,将菌株KMN-1 (NCBI登录号：KP211537)鉴定为细极链格孢(Alternaria tenuissima)。菌株KMN-11与变红镰孢(Fusarium incarnatum)、木贼镰孢(Fusarium equiseti)的相似度高达99%,进一步进行EF-1 α序列测定,结果显示KMN-11与木贼镰孢(Fusarium equiseti)茉缘关系相对较远,且培养性状与形态学特征有较大差异,故将菌株KMN-11 (NCBI登录号：KP211538)初步鉴定为变红镰孢(Fusarium incarnatum)。(4)采用绿色荧光蛋白标记法,进行小麦植株中内生真菌KMN-1和KMN-11菌株定殖情况的研究。绿色荧光标记结果表明,标记菌KMN-1的荧光明亮程度不稳定,转化子传代稳定性差,标记菌KMN-11的荧光明亮,转化子传代稳定性好。进一步测定了在不同条件下农杆菌介导菌株KMN-11转化时对转化效果的影响,结果表明,菌株KMN-11与农杆菌共培养的最佳时间为20h；农杆菌介导KMN-11转化时均需要乙酰丁香酮(AS)的存在,最佳使用浓度为200μg·mL-1；菌株KMN-11的转化子在PH为7的平板上长势最好,菌落直径最大,过酸过碱都不利于农杆菌转化菌株的生长。携带了绿色荧光蛋白基因的KMN-11菌株在小麦植株内定殖研究结果表明,浸种、灌根、喷雾以及注射4种方法处理后,菌株KMN-11在小麦植株内短期定殖,但定殖能力弱,在21d后植株中几乎检测不到目标菌体。(5)采用液-液萃取、薄层层析等方法,对看麦娘内生真菌KMN-11的抑菌活性成分进行了研究,结果表明,乙酸乙酯可以有效萃取KMN-11菌株发酵液中的杀菌活性物质。进一步对萃取物质进行薄层制备,获得A1-A8共8个成分,活性测定结果表明,A1、A2、A3和A5均对小麦赤霉病菌孢子萌发具有明显抑制作用。采用高分辨质谱仪对A1、A2、A3和A54个馏分进行质谱分析,结果表明,此4个馏分均不是纯化合物,有待进一步分离纯化。