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抗菌肽(Antimicrobial Peptides, AMPs)是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的小分子肽类物质,抗菌肽作为机体内的一类防御效应因子在生物界中普遍存在。它具有抗菌谱广、作用机制独特、不易产生抗药性、热稳定性、水溶性好、原料来源广泛等特点,在医疗卫生、农业生产、食品保健等领域具有广泛的应用前景。黄粉虫具有食性杂、抗病力强、生长周期短、养殖成本低且易人工饲养等特点,是用于诱导和研究昆虫抗菌肽的良好试验材料。为探索较优的黄粉虫抗菌肽诱导方法,并初步明确不同色型黄粉虫抗菌肽种类及性质的差异。本研究以黄色型和黑色型黄粉虫幼虫作为试验材料,选择病原菌、紫外线、农药和聚肌胞注射液为诱导源,对两种色型黄粉虫幼虫进行单一和复合诱导处理,每一诱导处理设置不同的诱导剂量和诱导时间。通过检测分析不同诱导处理黄粉虫抗菌肽粗提液的抑菌活性,获得黄粉虫抗菌肽的较优诱导处理。进一步对黄粉虫抗菌肽粗提液的抑菌谱及其对热和酸碱的稳定性进行测定。最后,采用Sephadex G-75凝胶过滤层析对黄粉虫抗菌肽进行初步分离纯化,并分别对抗菌肽粗提液和初步分离纯化后的抑菌活性成分进行Tricine-SDS-PAGE不连续电泳,估测抗菌肽的种类及分子量。本研究获得的主要结果如下：1.不同诱导处理对两种色型黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导效果差异明显：其诱导效果因诱导源、诱导剂量(或强度)和诱导时间不同而异,但不同诱导源的复合诱导与相应的单一诱导源诱导相比,其诱导效果无显著变化。所有诱导处理中,以乐果1500倍稀释液浸泡黄色型黄粉虫120d幼虫5s后,正常饲喂72h,其抗菌肽粗提液抑菌活性最强。2.经相同诱导处理后的黄、黑两种色型黄粉虫同日龄幼虫,其抗菌肽粗提液的抑菌活性表现出明显差异,但这两种色型黄粉虫幼虫抗菌肽粗提液抑菌活性的大小与其体壁颜色不存在明显的相关性。3.抗菌肽粗提液的热稳定性试验结果表明,黄粉虫抗菌肽具有较好的热稳定性。抗菌肽粗提液60℃水浴10min,其抑菌活性无显著变化,当水浴温度达到80～,水浴时间达到20min后,其抑菌活性开始随处理温度与时间的上升而较快的下降。4.通过测定抗菌肽粗提液的酸碱稳定性发现,在pH值为5.2左右,黄粉虫抗菌肽抑菌活性最强,当pH值低于5.2时,抗菌肽的抑菌活性随pH值降低而迅速下降,当pH值高于5.2时,抗菌肽的抑菌活性随pH值升高而逐渐下降。5.抗菌肽粗提液的抑菌谱测定结果表明,黄粉虫抗菌肽粗提液对金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性菌及大肠杆菌、铜绿假单胞菌、嗜水气单胞菌革兰氏阴性菌均有较强的抑菌活性,但对供试真菌(暗孢节菱孢、尖孢镰刀菌)无明显抑菌作用。6.黄粉虫抗菌肽粗提液d的Sephadex G-75凝胶过滤层析试验表明,只出现2个较明显的紫外吸收峰,其中仅58min～76min紫外吸收峰区的收集液具有抑菌活性。由此可见,Sephadex G-75对黄粉虫抗菌肽粗提液的分离效果不理想。7.抗菌肽粗提液的Tricine-SDS-PAGE不连续电泳检测结果显示,黄粉虫抗菌肽粗提液中含有分子量为62kD、45.5kD、37kD、26.4kD、12kD、9kD、1.3kD的抗菌多肽成分,其中分子量为12kD、9kD、1.3kD的抗菌肽成分相对含量较多。抗菌肽粗提液经Sephadex G-75凝胶过滤层析后,将其紫外吸收峰区收集液进行冷冻干燥浓缩后,再进行Tricine-SDS-PAGE,结果显示只有分子量为1.3kD的抗菌肽存在。由此可初步推知,黄粉虫抗菌肽粗提液中可能分子量为1.3kD的抗菌肽含量较多。