温肾疏肝清热三类复方对人乳腺上皮细胞增殖的影响

• 作 者: 叶媚娜
• 机 构: 上海中医药大学
• 出 处: 上海中医药大学
• 发表日期: 2005年期
• 关键词: 中药注射液 药物血清 原代培养 乳腺上皮细胞 细胞增殖 细胞周期

目的：观察温肾疏肝清热三类复方对人乳腺上皮细胞增殖的影响，为探讨中药治疗乳腺疾病的作用机理提供实验依据。
方法：用消化法从人正常乳腺组织中分离得到人乳腺上皮细胞，用雌二醇和孕酮导致乳腺上皮细胞增殖，并给予不同浓度的中药注射液和药物血清，同时设空白对照组、他莫昔芬对照组和莲必治对照组。首先就不同浓度的药物对细胞增殖的影响进行形态观察；其次用MTT法测定不同浓度药物干预下的光吸收值(OD)，观察细胞的增殖情况；再次用流式细胞术测定不同浓度中药注射液对细胞周期的影响；并测定培养液中的LDH值以观察细胞死亡情况。
结果：相差倒置显微镜下可见培养细胞呈典型的上皮细胞形态，电镜检查可见到细胞多数呈柱状，少数呈立方形，细胞表面有微绒毛，可见到紧密连接、缝隙连接和桥粒，符合正常上皮细胞的形态特征。
结论：用消化法可以得到比较纯净的乳腺上皮细胞；雌二醇和孕酮可以明显促进乳腺上皮细胞的增殖；高浓度温肾组中药注射液可以促进乳腺上皮细胞的增殖；疏肝组、清热组和低浓度温肾组中药注射液可以抑制乳腺上皮细胞的增殖。说明温肾组复方对乳腺上皮细胞的增殖存在双向调节作用，高浓度时，主要表现为拟雌激素样作用，低浓度时，则表现为抗雌激素样作用。疏肝组和清热组复方则对乳腺上皮细胞的增殖起抑制作用，并存在剂量依从关系，但其作用机理可能有所不同。