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目的: 本研究旨在中医基础理论指导下，结合现代分子生物学研究方法，观察临床急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)患者发病时自噬相关蛋白Beclin1的水平变化;通过复制体内外AP模型，明确通里攻下经典方剂“大承气汤”对胰腺腺泡细胞自噬的影响，并从Beclin1角度探讨其治疗AP的可能分子作用机制。 方法: 1.临床研究:课题组冻存的18例AP患者血清样本，轻型急性胰腺炎(mildacute pancreatitis，MAP)及重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)各9例，另有9例健康者血液作对照。冻存的AP患者血清系发病24h内抽取，检测血清淀粉酶(Amy)、 Beclin1及活性氧(ROS)水平，同时调阅对应AP患者的腹部CT并进行评分。 2.体外研究:采用雨蛙素诱导AR42J细胞复制AP体外模型，设置对照组、AP组、AP+大承气汤组及AP+3-MA组，各组再分为造模后3h和6h两个亚组，于相应时间点收集各组细胞及细胞上清液。全自动生化检测仪测定上清液Amy，采用ELISA法检测上清液Beclin1、ROS及TNF-α水平，BziPAR追踪检测细胞胰蛋白酶原激活程度，GFP-LC3荧光示踪观察细胞自噬体形成，Western blot及免疫荧光检测Beclin1和LC3Ⅱ在胰腺腺泡细胞中表达水平及变化。 3.体内研究:Wistar大鼠84只，通过腹腔内注射高剂量20％L-精氨酸复制AP大鼠模型，设置对照组、AP组、AP+大承气汤组及AP+3-MA组，各组再分为造模后3h、6h和24h三个亚组，每组时间点7只，各组大鼠于相应时间点处死，腹主动脉取血，并留取胰腺组织。全自动生化检测仪测定血清Amy，ELISA法检测血清TNF-α、Beclin1及ROS水平，大鼠胰腺组织作HE染色并进行病理评分;透射电镜观察胰腺组织微观结构中自噬形成，Western blot及免疫组织化学法检测Beclin1和LC3Ⅱ蛋白在胰腺组织中的表达水平。 结果: 1.临床研究:与对照相比，AP患者血清Amy，Beclin1，ROS水平显著升高(P＜0.05)，其中SAP较MAP上述指标明显升高（P＜0.05）;血清Beclin1水平与血清ROS及腹部CT评分有明显相关性(P＜0.05)。 2.体外研究:与对照组相比，AP组在造模后3h和6h点细胞上清液Amy、TNF-α、Beclin1、ROS及胰腺腺泡细胞胰蛋白酶原激活荧光强度均显著升高（P＜0.05）;与AP组相比，AP+DCQT组及AP+3-MA组在造模后3h和6h点上清液Amy、TNF-α、Beclin1、ROS及胰腺腺泡细胞胰蛋白酶原激活荧光强度均明显降低（P＜0.05）;上清液Beclin1水平与TNF-α、ROS及胰腺腺泡细胞胰蛋白酶原激活荧光强度有明显相关性（P＜0.05）;GFP-LC3荧光示踪提示AP细胞较正常细胞自噬体形成明显增多，而大承气汤或3-MA作用后自噬体减少;Western blot法检测结果表明，AP细胞Beclin1和LC3Ⅱ表达水平较对照组在造模后3h和6h点均明显升高(P＜0.05)，经大承气汤或3-MA干预后其水平显著下降(P＜0.05);免疫荧光检测结果也有相同提示。 3.体内研究:AP大鼠血清Amy、 Beclin1、ROS、TNF-α水平及胰腺组织病理评分在各时间点均较Ctr组显著升高(P＜0.05);血清Beclin1水平与TNF-α、ROS及胰腺组织病理评分有明显相关性(P＜0.05)。电镜结果显示AP时胰腺组织自噬体明显增多，而大承气汤或3-MA作用后胰腺细胞自噬体减少;大承气汤及3-MA可明显减轻大鼠血清Amy、Beclin1、ROS及TNF-α水平（P＜0.05）;Western blot法及免疫组化结果均表明，AP大鼠胰腺Beclin1和LC3Ⅱ蛋白水平在各时间点均较Ctr组显著升高（P＜0.05）;大承气汤及3-MA均可以显著下调AP大鼠胰腺Beclin1和LC3Ⅱ蛋白水平(P＜0.05)。 结论: 1.AP患者发病的早期血清Beclin1水平就明显升高，并与AP的病情严重程度呈正相关;Beclin1可能是早期预测AP严重程度的有效血清标记物; 2.大承气汤可抑制AP时胰腺腺泡细胞自噬，并可下调Beclin1表达水平; 3.抑制Beclin1介导的细胞自噬可能是大承气汤抗AP的作用机制之一。