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目的:帕金森病(Parkinson’s disease,PD),又称震颤麻痹,是一种常见的老年神经系统变性疾病,严重影响患者的身心健康。随着全球老龄化进程的加速,PD发病率逐年升高。PD主要病理改变为中脑黑质致密部(Substantia nigra pars compacta,SNpc)多巴胺(dopamine,DA)能神经元发生显著变性死亡。PD的发病机制至今尚不明确,目前公认的观点是,DA神经元凋亡、炎症反应和氧化应激是PD发病的主要原因,其中炎症反应在PD的发病进展过程中发挥重要作用。抗炎可能会降低PD的发病风险和延缓其病程的进展。梓醇是一种从地黄中提取出的环烯醚萜化合物,已有研究表明梓醇具有抗凋亡、抗氧化和抗炎等多种药理活性,通过减少炎症因子的释放发挥神经保护作用。然而,梓醇是否对PD具有防治作用及其机制尚未见报导。因此,本论文应用PD小鼠模型,对梓醇的DA神经元保护作用及其相关机制进行了系列研究。研究方法:C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、模型组和梓醇处理组。采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)处理小鼠构建PD模型,梓醇腹腔注射处理2周。通过旷场、爬杆和旋转棒等行为学试验分别对三组小鼠的运动能力和探索行为进行检测;免疫组织化学方法分别检测三组小鼠黑质和纹状体酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)阳性细胞表达情况;Western blot检测三组小鼠黑质部TH和α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)、纹状体部TH和DA转运体(dopamine transporter,DAT)蛋白的表达水平,黑质部凋亡相关蛋白Caspase-9、Cleaved-Caspase-9、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、Bcl2和Bax、MKK4/JNK/c-Jun通路相关蛋白,抗氧化物酶SOD1、NLRX1和GPX4,炎症因子GFAP、Iba1、IL-1β、TNF-α和NLRP3、神经营养因子生长相关蛋白4(Growth associated protein 43,GAP43)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达水平;以及对SOD1和ROS的活性进行测定;免疫荧光共聚焦激光扫描显微镜分析黑质部TH、GFAP和Ibal标记阳性细胞形态学特征。研究结果:1、旷场行为学实验结果显示:与对照组相比,MPTP诱导的帕金森模型小鼠减少了模型小鼠进入中心区域行走的距离和次数,给予梓醇处理后,改善小鼠进入中心区域行走的距离和次数,表明梓醇改善了MPTP诱导的帕金森模型小鼠的探索行为;爬杆实验和旋转棒实验三组小鼠行为改变没有明显变化。2、免疫组织化学和Western blot结果显示:与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部和纹状体部TH阳性细胞数减少;以及黑质部TH蛋白表达水平下降和α-Syn蛋白表达水平升高,同时纹状体部TH和DAT蛋白表达水平下降。给予梓醇处理模型小鼠后,上述指标被抑制或者恢复,说明成功诱导PD模型。3、Western blot结果显示:与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部位促凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-9、Cleaved-Caspase-3蛋白的表达水平升高,给予梓醇处理后,上述指标被抑制,同时Bcl2/Bax比值下降,虽然Caspase-9,Caspase-3没有明显变化,表明梓醇显著抑制MPTP引起的DA能神经元凋亡。4、Western blot结果显示:与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部p-MKK4、p-JNK、p-c-Jun蛋白表达升高;与MPTP组相比,给予梓醇处理后的模型小鼠p-MKK4、p-JNK、p-c-Jun蛋白表达下降,表明梓醇可能是通过调节MKK4/JNK/c-Jun信号通路抑制DA能神经元凋亡的。5、与对照组相比,Western blot结果显示MPTP组小鼠黑质部SOD1和GPX4蛋白的表达水平下降,NLRX1蛋白的表达水平上升,与MPTP组相比,给予梓醇处理后SOD1和GPX4蛋白的表达水平上升,NLRX1蛋白的表达水平下降。此外,梓醇显著恢复SOD1的活性水平,通时抑制ROS的活性水平。表明梓醇在MPTP对DA能神经元有抗氧化作用。6、免疫荧光共聚焦显微镜结果显示:与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部GFAP和Iba1表达升高,给予梓醇处理后,GFAP和Iba1表达下降,说明星形胶质细胞和小胶质细胞的激活可以被梓醇抑制;Western blot结果显示与免疫荧光共聚焦结果一致,与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部炎症因子和炎性小体GFAP、Iba1、IL-1β、TNF-α和NLRP3蛋白表达水平升高,给予梓醇处理后抑制上述指标。提示梓醇能缓解由MPTP引起的炎症反应。7、Western blot结果显示:与对照组相比,MPTP组小鼠黑质部神经营养因子GAP 43和VEGF蛋白表达平下降,给予梓醇处理后,GAP 43和VEGF蛋白表达上升。表明梓醇具有促进神经再生作用。结论:在MPTP诱导的帕金森模型小鼠中,梓醇对DA能神经元具有抗凋亡、抗氧化作用、抑制炎症反应和促进神经再生作用,其机制可能通过调控MKK4/JNK/c-Jun信号通路发挥神经保护作用。