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新基因p23定位于人染色体1p34.3，编码由203个氨基酸残基构成的假定蛋白，已通过RACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)技术、全长cDNA文库检索等技术确定了转录起始位点。在新基因的结构和功能研究中，分析基因的表达调控规律是其重要研究内容之一。为此，我们采用GeneRunner、Proscan和TFsearch等生物信息学软件预测了p23基因及其变异体的5′调控区，对其假定的近端启动子（距转录起始位点约2kb）的核酸序列分析发现其序列中存在1个不典型TATAbox（TATAATAAT）、3个不典型的CAATbox（GGCCCAAT）、7个GCbox（GGGCGG）、1个E2F位点（ATCTCGCGCA）、2个AP1位点（TGASTCAG）和3个AP4位点（TGCAGCTCGTG）。同时，通过分析p23变异体自其转录起始位点起上游800bp的假定调控序列，也发现了1个不典型的TATAbox、3个不典型的CAATbox、6个GCbox、1个AP1位点、1个E2F位点和1个AP4位点。 根据以上生物信息学分析，本文将根据p23假定启动子区域构建的截短体和突变体构建入pGL3–Basic报告基因载体。通过荧光素酶分析比较了一系列重组体的转录相对活性，我们发现p23基因假定近端启动子区具有转录起始调控功能，尤其是以第二个CAATbox（–166bp～–169bp）和第三个CAATbox（–256bp～–259bp）作用显著，是关键的调控元件。此外，针对CAATbox而构建的突变体P2m1、P2m2、P2m3的双荧光素酶相对活性分析结果也证实以上结论。在针对p23变异体的系列重组体进行的双报告基因分析研究中，本研究还发现p23变异体转录起始位点上游第二个CAATbox（–228bp～–233bp）可明显提高转录活性，因此它可能和其它CAATbox协同作用。进而应用电泳迁移率变动分析（EMSA）确定p23基因的近端和远端启动子与转录因子Sp1之间存在相互作用，其确切位置极有可能是近端启动子区上游1724bp处的GCbox7，属CpG岛区域。此外，本文运用染色质免疫沉淀（ChIP）方法来进一步证明p23基因的近端和远端启动子及其变异体的GCbox区域与含Sp1结合因子在内的参与了的转录起始复合物的转录起始过程。 通过此项研究，为进一步研究p23基因及其变异体的表达调控机制和研究p23基因与肺癌等癌症的发生和发展中的作用奠定了基础。