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本研究通过对浙江某制药厂污水处理池的活性污泥进行长期驯化、富集,分离到1株能以丙硫醇为唯一碳源和能源生长的菌株,命名为S-1。Biolog GenⅢ微孔板24 h时所显示出的S-1“表型指纹”与标准菌株恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的SIM值>0.646;通过16S rDNA序列分析,发现菌株S-1与模式菌株恶臭假单胞菌NBRC 14164T(Pseudomonas putida NBRC 14164T,GenBank:AP013070)的相似度达98.4%。因此,该丙硫醇降解菌S-1确定为Pseudomonas putda(恶臭假单胞菌)。S-1能以丙硫醇为唯一碳源生长,并能在9h内将2.5 mg/bottle丙硫醇完全降解,比生长速率为0.19 h-1,细胞得率为0.36 g干重/g丙硫醇,菌株降解活性较高。考察了环境条件对S-1降解丙硫醇的影响,结果表明:最较适宜的温度和pH值分别为30℃和7.0;无机氮源NH4Cl浓度、Mg2+浓度对S-1生长及丙硫醇将降解影响较小;Ca2+浓度较高时对菌体S-1有一定的毒害作用;NaCl浓度在低于0.85%的情况时对S-1降解丙硫醇没有较大影响;S-1对环境营养要求较低,表明此菌株在环境中具有较好的竞争力。采用响应面分析对丙硫醇降解影响较大的因素(温度、pH、盐度)进行优化分析,得出温度与盐度的交互影响对降解率极显著,并且最优化条件为温度28.2 ℃、pH 7.2、盐度0%。在此条件下,丙硫醇在6 h时的去除率达到62.8%。通过研究发现,P.putida S-1无需诱导即可稳定降解丙硫醇,并且具有较宽的底物广谱性,可同时高效降解多种污染物,这些特性不仅解决了环境微生物扩大培养的难题,也保证了菌株应用于废水处理的工程应用中降解的稳定性。为进一步深入探讨微生物降解丙硫醇的降解机理,由GC/MS、HPLC分析分别检测到二丙基二硫醚、3-己醛、2-乙醛、3-己醇、2-己醇及单质硫等中间产物;硫元素在S-1降解过程中94.2%转化成了 SO42-,并且碳矿化率为56.0%,丙硫醇在菌株S-1降解下最终转化为SO42-、CO2、水和细胞物质。根据菌株S-1的16S rDNA序列设计了特异性引物和探针,扩增目的片段,制备阳性标准质粒,制作了S-1荧光定量PCR的标准曲线,并得到最佳的反应条件和反应体系,且扩增曲线重复性较好。这为进一步研究降解菌S-1提供了参考。