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临床样本复杂的生物化学性质,目标检测物的低丰度对检验技术提出了越来越高的要求。而电化学传感器由于灵敏性高、响应快、成本低廉、操作简单、可用于微量分析等优点极大地适应了临床诊断和药物检测分析的发展。近年来,研究者们基于电化学传感平台并结合各种高效放大策略实现了对mi RNA,的检测。其中纳米结构自组装所特有的结构、光学、电学等性质为新型纳米电化学传感研究提供了新的契机。同时,随着分子生物学的发展,核酸扩增检测技术得到迅速发展。本研究基于电化学平台上结合链置换与纳米自组装进行mi RNA-377检测,主要研究内容分为两部分:1.针对靶物质的链置换反应。模板链主要包括三个区域:靶物质识别区域,剪切酶识别区域,下游引物区域,在有剪切酶识别位点的模板存在条件下,靶物质能互补性地与模板链进行特异性结合,并在KF聚合酶,d NTP存在的条件下进行不断的聚合,产生的双链暴露出酶切位点,并在剪切酶的作用下进行剪切,不断循环产生大量用于连接TWJ纳米结构的连接物。连接物可以分别与捕获探针和Y型纳米结构杂交使两者结合在一起。以此进行信号的转移和输出。2.Y型纳米结构自组装的形成与电化学传感检测。将三种各自互补配对的单链置于适当的离子浓度的溶液中,链与链之间通过杂交结合形成稳定的Y型纳米结构,其中一条链的未互补结合区域与链置换反应产生的连接产物互补并连接到捕获探针上。通过对Y型纳米结构的生物素修饰,与连接有碱性磷酸酶的链霉亲和素相结合,催化底物α-萘酚反应,以此获得电化学信号。这种电化学传感策略对mi RNA-377的线性检测范围在1 f M到1 n M之间,检测限为0.68 f M,通过实验对比也获得了较好的特异性和重复性,再现性及稳定性。基于链置换和Y型纳米结构的电化学传感器将两种放大技术结合,实现了对靶物质的高灵敏高特异性检测,并成功的将其应用于实际样本的检测,为医药领域与早期诊断应用方面高灵敏检测mi RNA提供了新的技术支持。