论文部分内容阅读
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种S形或弧形弯曲的革兰氏阴性细菌。它能诱发人类的慢性胃炎、消化性溃疡、胃粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤、胃癌等。H.pylori的致病作用主要表现为:细菌在胃部黏膜上的定植、侵入宿主的防御系统、毒素的直接作用及诱导炎症反应等间接作用而损害宿主组织。其中菌和细胞的定植是H.pylori侵染致病的初始和关键步骤,而菌体随后向细胞内释放毒力因子,通过一系列的信号传导而导致炎症反应,则是幽门螺杆菌在体内有诱发相关疾病,包括癌症的基础。本实验就从抵抗H.pylori诱发的炎症反应和抵抗病原菌和宿主细胞黏附的角度,分别研究植物来源的小分子化合物染料木素系列衍生物和大分子芦荟多糖抵抗H.pylori相关疾病的潜在效用。
染料木素是一种首先在大豆中发现的一种异黄酮,它可有效预防和治疗癌症及其他慢性疾病。染料木素还可以特异性抑制酪氨酸激酶的活性,酪氨酸磷酸化在核转录因子(NF-κ B)的激活过程中起重要作用,而NF-κ B的激活常常在由细菌感染引起的炎症反应中扮演着重要角色。研究证明,染料木素能够抑制H.pylori刺激胃腺癌细胞MKN45诱导的IL-8的水平。甲硝唑是抗H.pylori三联疗法中的重要抗生素,甲硝唑在体内外对革兰氏阴性和阳性厌氧菌均有较好的抗菌作用。但是目前甲硝唑的广泛使用,使大多数菌株对其有耐药性。本实验将染料木素和甲硝唑进行结构改造,合成系列新化合物,经抗菌活性测定后,发现许多化合物,特别是作为甲硝唑和染料木素衍生物中的化合物4-7和19、20,对H.pylori尤其是临床耐药菌株表现出了很强的、高选择性的抗菌活性。化合物6的抗菌活性是此系列化合物中最强的(MIC为0.39μg/ml),其抗菌活性大约是甲硝唑的100倍之多。除了抗菌活性外,化合物6还可以显著的降低HPE诱导胃腺癌上皮细胞AGS产生的IL-8的水平,并且急性毒性实验显示化合物6毒性较低。表明化合物6可能成为一种新的、有效的治疗H.pylori相关疾病的治疗手段。
研究发现,随着H.pylori的细菌-宿主关系的不断深入,宿主表面细菌的糖基化受体不断的被发现。而许多源自绿茶、艾等植物的多糖通过类似于糖基化受体的结构,来抑制细菌和宿主细胞黏附。芦荟作为一种传统中药,对于胃肠道等疾病有较好疗效。本实验研究了芦荟酸性和中性多糖对H.pylori和E.coli黏附宿主细胞的影响。结果显示,酸性多糖在0.5和1.0mg/ml时可明显抑制H.pylori对胃腺癌细胞MKN45的黏附以及E.coli对大肠结癌细胞LOVO的黏附,而中性多糖对这两种病原菌的黏附均没有明显抑制作用。而芦荟酸性、中性多糖均不能抑制H.pylori或者E.coli的生长。这表明,芦荟酸性多糖可有效抑制幽门螺杆菌和大肠杆菌对宿主细胞的黏附,从而可能从两种病原菌感染的初始阶段来抵抗其后期引发的一系列相关疾病。另外,由于芦荟酸性多糖对实验中的两种病原菌的生长繁殖没有抑制作用,从而也可以减弱病菌对多糖抗性的产生,从而达到更长期有效的防治效果。