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目的：
基于补肾健骨方对斑马鱼模型毒效分析，并联合补肾健骨方对（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者骨代谢、中医症候积分评分、血生化指标及骨密度的临床疗效观察，探讨补肾健骨方对（肝肾不足型）糖皮质激素使用者骨的保护作用机制。
方法：
实验室研究部分：将补肾健骨方（颗粒剂）拆解后的内容物溶解在生理盐水当中配置成3个浓度剂量（100μg/ml、400μg/ml、1000μg/ml）干预斑马鱼胚胎发育，首先进行斑马鱼发育毒性观察，在实验干预措施开始后，观察该方对斑马鱼不同时间点(24h、48h、72h、96h、120h)的发育影响，并找出该方对斑马鱼发育的安全剂量，然后将（安全剂量浓度）补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松模型进行干预，并设置空白与模型组，在144hpf时，采用钙黄绿素染液染色后，荧光显微镜下观测椎骨体矿化数，观察补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松症预防效果。临床观察部分：将符合纳入标准的60例患者随机分为治疗组和对照组各30例，对照组给予骨质疏松症预防基础治疗，即口服碳酸钙D3片1片qd，治疗组在对照组的基础上加用补肾健骨方（颗粒剂）tid，3个月观察期后，分别对比两组患者治疗前后的中医症候评分、血清β-CTX、血清11β-HSD1、血生化指标（血清碱性磷酸酶、血钙、血磷）及骨密度检测。
结果：
1、补肾健骨方对斑马鱼模型毒效观察的实验部分：在120小时内，补肾健骨方100μg/ml组在斑马鱼胚胎死亡率和孵化率方面较空白对照组无统计学差异(p＞0.05)，应视为安全剂量。在处理72h后，即144hpf时，对各组斑马鱼仔鱼椎骨体进行钙黄绿素染色后荧光观察发现，经补肾健骨方组干预后的斑马鱼椎体骨矿化数量较模型组显著升高，与模型组比较差异有统计学意义(p＜0.05)，表明该方对泼尼松诱导的GIOP斑马鱼骨骼具有保护作用。
2、补肾健骨方临床观察部分：①总疗效：治疗3个月后：治疗组30例患者，显效3例，有效19例，无效8例，有效率73.3％;对照组30例患者，显效1例，有效13例，无效16例，有效率46.7％。两组经3个月治疗后临床总疗效对比差异有统计学意义(p＜0.05)。说明含补肾健骨方的治疗组临床总疗效优于对照组。②中医症候积分方面：经3个月治疗后治疗组患者中医症候积分方面优于对照组（p＜0.05）。③血清β-CTX、11β-HSD1方面：治疗组在经3个月治疗后患者血清β-CTX、11β-HSD1检测与同组治疗前、与对照组治疗后的组间比较均有统计学意义（p＜0.05）。④血清钙方面：治疗组经3个月治疗后血清钙较同组治疗前、对照治疗后比较差异有统计学意义（p＜0.05），表明治疗组能有效提高患者血清钙水平。⑤血清ALP方面：治疗组经3个月治疗后血清ALP较同组治疗前、对照治疗后比较差异有统计学意义（p＜0.05），表明治疗组可以降低患者血清ALP指标。⑥血清磷及骨密度方面：两组经3个月治疗后患者骨密度检测及血清磷水平差异均无统计学意义(p＞0.05)。
结论：
补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松症具有预防作用，该方可以有效的降低（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者的血清β-CTX、11β-HSD1、ALP水平，增加血清钙的含量，对改善（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者中医症候积分的疗效显著，值得临床推广。
基于补肾健骨方对斑马鱼模型毒效分析，并联合补肾健骨方对（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者骨代谢、中医症候积分评分、血生化指标及骨密度的临床疗效观察，探讨补肾健骨方对（肝肾不足型）糖皮质激素使用者骨的保护作用机制。
方法：
实验室研究部分：将补肾健骨方（颗粒剂）拆解后的内容物溶解在生理盐水当中配置成3个浓度剂量（100μg/ml、400μg/ml、1000μg/ml）干预斑马鱼胚胎发育，首先进行斑马鱼发育毒性观察，在实验干预措施开始后，观察该方对斑马鱼不同时间点(24h、48h、72h、96h、120h)的发育影响，并找出该方对斑马鱼发育的安全剂量，然后将（安全剂量浓度）补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松模型进行干预，并设置空白与模型组，在144hpf时，采用钙黄绿素染液染色后，荧光显微镜下观测椎骨体矿化数，观察补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松症预防效果。临床观察部分：将符合纳入标准的60例患者随机分为治疗组和对照组各30例，对照组给予骨质疏松症预防基础治疗，即口服碳酸钙D3片1片qd，治疗组在对照组的基础上加用补肾健骨方（颗粒剂）tid，3个月观察期后，分别对比两组患者治疗前后的中医症候评分、血清β-CTX、血清11β-HSD1、血生化指标（血清碱性磷酸酶、血钙、血磷）及骨密度检测。
结果：
1、补肾健骨方对斑马鱼模型毒效观察的实验部分：在120小时内，补肾健骨方100μg/ml组在斑马鱼胚胎死亡率和孵化率方面较空白对照组无统计学差异(p＞0.05)，应视为安全剂量。在处理72h后，即144hpf时，对各组斑马鱼仔鱼椎骨体进行钙黄绿素染色后荧光观察发现，经补肾健骨方组干预后的斑马鱼椎体骨矿化数量较模型组显著升高，与模型组比较差异有统计学意义(p＜0.05)，表明该方对泼尼松诱导的GIOP斑马鱼骨骼具有保护作用。
2、补肾健骨方临床观察部分：①总疗效：治疗3个月后：治疗组30例患者，显效3例，有效19例，无效8例，有效率73.3％;对照组30例患者，显效1例，有效13例，无效16例，有效率46.7％。两组经3个月治疗后临床总疗效对比差异有统计学意义(p＜0.05)。说明含补肾健骨方的治疗组临床总疗效优于对照组。②中医症候积分方面：经3个月治疗后治疗组患者中医症候积分方面优于对照组（p＜0.05）。③血清β-CTX、11β-HSD1方面：治疗组在经3个月治疗后患者血清β-CTX、11β-HSD1检测与同组治疗前、与对照组治疗后的组间比较均有统计学意义（p＜0.05）。④血清钙方面：治疗组经3个月治疗后血清钙较同组治疗前、对照治疗后比较差异有统计学意义（p＜0.05），表明治疗组能有效提高患者血清钙水平。⑤血清ALP方面：治疗组经3个月治疗后血清ALP较同组治疗前、对照治疗后比较差异有统计学意义（p＜0.05），表明治疗组可以降低患者血清ALP指标。⑥血清磷及骨密度方面：两组经3个月治疗后患者骨密度检测及血清磷水平差异均无统计学意义(p＞0.05)。
结论：
补肾健骨方对泼尼松诱导的斑马鱼骨质疏松症具有预防作用，该方可以有效的降低（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者的血清β-CTX、11β-HSD1、ALP水平，增加血清钙的含量，对改善（肝肾不足型）糖皮质激素使用患者中医症候积分的疗效显著，值得临床推广。