异硫氰酸苄基酯对人舌鳞癌细胞生长的影响

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研究背景:异硫氰酸酯是天然存在于辣根、芥末、甘蓝、花椰菜、卷心菜和水芹菜等十字花科蔬菜中的硫代葡萄糖苷的降解产物,研究表明异硫氰酸酯具有高度的生物活性,如杀菌、抑制血小板聚集等作用。流行病学研究结果表明经常食用十字花科蔬菜能够降低人们患肺癌、胃癌、前列腺癌、肠道癌的危险,并证实其所含的异硫氰酸酯化合物(isothiocyanates, ITCs)具有防癌、抑癌作用。同时也是十字花科蔬菜最主要的抗肿瘤活性成分。方法:本研究以人舌鳞状细胞癌细胞系Cal-27和SCC-9为实验对象,分别采用2-对磺酸基苯基-3-(4,5-二甲基噻唑)-5-(3-羧甲氧基苯基)-二氢四唑嗡盐(MTS)检测法、细胞形态观察、流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期观察BITC对人舌鳞癌细胞生长的影响以及用Western Blot法检测最具代表性的异硫氰酸酯----异硫氰酸苄基酯(Benzyl-isothiocyanate, BITC)对人舌鳞癌细胞Caspase 8, Caspase 9, Caspase 3蛋白表达的影响,通过探讨BITC对舌鳞癌细胞增殖、凋亡的作用,了解异硫氰酸酯能否用于舌癌的预防。结果:实验结果显示,当BITC的浓度为7.5μM作用48h时,舌鳞癌细胞的抑制率为56.2%,与DMSO对照组比较有显著性差异(p<0.05)。在倒置显微镜下观察经7.5μM BITC作用48h后的人舌鳞癌细胞,其细胞形态与DMSO对照组相比有明显的差异。经2.5μM、5μM、7.5μM BITC作用48h后的人舌鳞癌细胞的凋亡率分别为3.7%、6.2%、8.6%,呈一定的量效关系。BITC作用24 h后的人舌鳞癌细胞G2/M期细胞比例增加,且有显著性差异,说明细胞在BITC作用下,细胞周期阻滞在G2/M期。Caspase 8, Caspase 9, Caspase 3蛋白表达水平随着BITC浓度增加而逐渐呈上升趋势,与BITC诱导细胞凋亡结果一致。结论:本研究BITc通过抑制人舌鳞癌细胞的增殖,并通过Caspase 8,9和3途径诱导细胞凋亡,抑制舌鳞癌细胞生长,可作为舌癌预防的化合物。
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